FHL-1在低氧肺血管平滑肌细胞中的表达

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研究背景:肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)和其他一些慢性缺氧性肺部疾病常见的临床表现,各型肺动脉高压的共同特征是由肺动脉血管平滑肌细胞增殖、迁移以及细胞外基质异常沉积;同时无肌型血管发生肌化,从而引起的肺血管的结构重构(pulmonary vascular remodeling, PVR),导致肺循环外周阻力的增加。但是引起肺动脉高压和血管重塑过程的分子机制目前尚不完全清楚。FHL-1 (4个半LIM结构域,four and a half LIM domain 1,FHL-1)是LIM家族中的一种新蛋白质,有研究表明其在平滑肌分化和迁移过程中起重要调节作用。但是目前有关FHL-1在低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension, HHP)形成中的作用的研究报道还很少。目的:观察低氧诱导的大鼠肺动脉血管平滑肌细胞中FHL-1蛋白的表达情况,初步探讨FHL-1在低氧肺动脉高压形成和肺血管重塑中的意义。方法:采用组织贴块法从正常大鼠肺动脉中分离出血管平滑肌细胞并进行离体细胞培养,分别于常氧(含21%O2、5%CO2、74%N2)和低氧(含1.5%O2、5%CO2、93.5%N2)状态下收集培养的细胞,用免疫组织化学链霉素菌抗生生物素蛋白—过氧化物酶法(S-P法)检测FHL-1蛋白的表达。结果:①体外培养的血管平滑肌细胞主呈长梭形,并出现“峰-谷”样生长特征。用抗α-SMA免疫组化染色的方法鉴定所培养的细胞为血管平滑肌细胞,纯度达到98%以上。②FHL-1在低氧状态下表达明显升高,平均光密度值为0.12283±0.02061,FHL-1在常氧状态下的平均光密度值为0.06077±0.01755,P<0.05,统计学上有显著性差异。结论:FHL-1蛋白在低氧诱导的肺血管平滑肌细胞中表达上调,提示其可能与肺动脉高压的形成以及肺血管重塑有关。
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