滋阴固本颗粒对EAE大鼠的防治作用及视神经内MBP表达的研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nayitian1046906153
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  目的: 观察滋阴固本颗粒对Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的发病情况、组织病理变化及视神经内MBP表达水平的影响,同时比较不同剂量滋固本颗粒的干预与强的松片干预的疗效差别,初步探讨滋阴固本颗粒对EAE模型的影响及可能作用机制,为探索多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)的中药治疗提供有意义的基础实验依据。   方法:用豚鼠脊髓匀浆(guinea pig spinal cord homogenate,GPSCH)、完全福氏佐剂(complete freund’S adguvant,CFA)、百日咳疫苗(pertussis vaccine, PV)致敏雌性Wistar大鼠,建立EAE模型,并用滋阴固本颗粒、醋酸泼尼松干预治疗。72只雌性Wistar大鼠随机分成6组:空白组(不做任何处理),模型组(EAE+生理盐水),激素组(EAE+醋酸泼尼松片6.25mg/kg·d),中药高剂量组(EAE+滋阴固本颗粒53.3g/kg·d),中药中剂量组(EAE+滋阴固本颗粒26.7g/kg·d),中药低剂量组(EAE+滋阴固本颗粒13.3g/kg·d),每组各12只。将免疫抗原注射日定为第0天,不同剂量滋阴固本颗粒组、泼尼松组大鼠在抗原免疫后第1天开始,分别给予相应剂量药物干预,每天一次,直到处死。观察各组大鼠的行为学变化(发病、体重变化情况、神经功能评分)。分别于大鼠免疫后第14天(相当于EAE组发病高峰期)取材,取大鼠视神经组织切片进行检测:HE染色观察其组织形态学变化和免疫组化法检测各组大鼠视神经组织内MBP表达情况。统计学分析采用SPSS19.0软件进行。   1 各组大鼠的行为学改变:①正常组无大鼠发病。②模型组大鼠发病最多,症状最典型,与EAE组比较,中药高剂量组、中剂量组和激素组组可降低发病率,减轻临床症状,减少体重下降(p0.05)。   2 各组大鼠的形态学改变:①正常组大鼠视神经内无炎性病灶及脱髓鞘改变。②视神经组织病理学检查结果显示,模型组神经轴束间出现许多大小不等空泡,视神经严重水肿,轴束不规则肿胀,排列紊乱,轴突变性部分降解,网状分层形成大量的空泡,可见到大量单核细胞浸润淋巴细胞浸润。③不同剂量中药组和激素组组大鼠视神经组织见类似模型组改变,但炎性细胞浸润的程度及范围减少,且病灶数较模型组明显减少。   3 各组大鼠的免疫组织化学改变   ①正常组大鼠视神经内MBP表达无异常。②模型组与正常组比较,MBP表达明显减少(p0.05)。⑤中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量之间比较,MBP表达增强(p<0.01),中药高中剂量之间无明显差异(p>0.05)   结论:   1 本研究中复制的EAE模型成功、稳定、可靠。   2 滋阴固本颗粒可以降低EAE大鼠的发病率,抑制体重下降,减轻发病时神经功能损伤的程度。   3 滋阴固本颗粒可以减轻EAE大鼠中枢神经系统内炎性细胞浸润的程度,减轻髓鞘脱失。   4 滋阴固本颗粒发挥其防治作用的机制是通过增强碱性髓鞘蛋白(MBP)在视神经组织内的表达而发挥对视神经的保护作用,且这种作用有剂量相关性。
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