多聚羟基烷酸的代谢调控与基因工程菌的构建

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多聚羟基烷酸是一类由生物合成的结构简单的高分子聚合物,它不仅具有石化塑料的特性,而且具有生物可降解性、生物相容性、降解产物无毒性的特性,是一种环境友好型的生物材料.这种材料对于解决白色污染的环境问题以及医学组织工程框架材料有着重要的应用价值.我们在研究费氏中华根瘤菌(S.fredii)合成多聚羟基丁酸(PHB)的基础上,在以烷酸盐作为调节剂,进行了代谢调控,获得了羟基丁酸和羟基己酸共聚体[P(HB-HH)]和羟基丁酸和羟基辛酸共聚体[P(HB-HO)]两种新型的多聚羟基烷酸(PHAs),其中P(HB-HO)填补了PHAs系列生物材料的空白.并且研究了代谢控制发酵的相关参数,初步制定出生产这两种产品的生产工艺.根据费氏中华根瘤菌在以葡萄糖为碳源时合成PHB,而在烷酸盐提供一定环境胁迫压条件下,改变了代谢方向,我们推导出该菌合成PHAs的代谢途径.根据P(HB-co-HH)P(HB-co-HO)的理化及生物学性质,这两种新型生物材料在医学组织工程有着良好的应用前景.此外,我们采用分子生物学技术,以携带orfZ基因(4-羟基丁酰辅酶A转移酶)的转座载体pTn5cat的E.coli为供体菌,以S.fredii为受体菌,构建合成3-羟基丁酸和4-羟基丁酸共聚体的基因工程菌.该菌通过代谢调控可能合成全新的PHAs三聚体,开发一类新型的生物材料.
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