【摘 要】
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将小麦黄色花叶病毒(WYMV)中国分离物(WYMV-HC)RNAl的三个cDNA片段拼接, 获得含有RNAl全长cDNA的克隆pGWSSY28.对其进行改造,设计引物利用PCR反应在RNAlcDNA5 端加入T7启动子
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将小麦黄色花叶病毒(WYMV)中国分离物(WYMV-HC)RNAl的三个cDNA片段拼接, 获得含有RNAl全长cDNA的克隆pGWSSY28.对其进行改造,设计引物利用PCR反应在RNAlcDNA5 端加入T7启动子序列,3端引入Smal位点,得到cDNAp克隆pUWJSSY32.体外转录试验表明,能大量产生全长RNAl的转录物.建立了优化的WYMV机械接种方法,提高了接种效率. 改进ELISA检测WYMV的方法,并结合RT-PCR检测,提高了检测的准确性.对易感病小麦进行WYMV(雅川)分离物的连续继代接种,现已获得第13代病毒分离物.高代次病毒分离物接种小麦苗,发病时间短、症状明显.对WYMV高代次病毒与野生型病毒的两条RNA不同区段进行RT-PCR检测,初步结果表明基因组没有发生连续较长片段的缺失.
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