【摘 要】
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本文选择芘（PYR）和二苯并[a,h]蒽（DBA）两种典型多环芳烃（PAHs）,先通过一系列实验研究了两种PAHs与DNA的体外结合模式,再用多种公式计算了两种PAHs与DNA的结合强度。选择与DNA结合强度更大的DBA为研究对象,测定了各种环境因素对DBA与DNA相互作用的影响。结果表明:（1）PYR和DBA都能与DNA在体外发生相互作用,且PYR、DBA的加入分别能使DNA熔点温度增加10°C
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（21966008）基于紫外强化DNA共价嵌合作用的DNA选择性俘获消除黄曲霉毒素机理研究,2020.01-2023.12； 广西自然科学基金项目（2018GXNSFDA281030） DNA固定化丝素滤材制备及其嵌合俘获消除多环芳烃作用机理研究,2019.01-2022.12； 广西自然科学基金项目（2020
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本文选择芘（PYR）和二苯并[a,h]蒽（DBA）两种典型多环芳烃（PAHs）,先通过一系列实验研究了两种PAHs与DNA的体外结合模式,再用多种公式计算了两种PAHs与DNA的结合强度。选择与DNA结合强度更大的DBA为研究对象,测定了各种环境因素对DBA与DNA相互作用的影响。结果表明:（1）PYR和DBA都能与DNA在体外发生相互作用,且PYR、DBA的加入分别能使DNA熔点温度增加10°C和12°C左右。荧光光谱实验中,DNA对PYR和DBA均有荧光猝灭作用。圆二色谱测定发现,加入PYR和DBA都能引起DNA二级构象的改变。以上变化均符合小分子与DNA的嵌插结合特征。最后以溴化乙锭（EB）为对照组,用磁珠吸附结合荧光显微镜观察,直观地证实了两种PAHs与DNA的嵌插结合。（2）DNA对两种PAHs的猝灭机制均是通过形成PAH-DNA复合物而产生的静态猝灭。25°C时,PYR、DBA与DNA相互作用的结合常数分别为1.3890×10~5 L/mol和2.0394×10~5 L/mol。热力学结果显示,形成PYR-DNA和DBA-DNA复合物的过程都是自发的,且以氢键和范德华力为主要驱动力。常温下,PYR、DBA与DNA的结合饱和值分别为0.70和0.81。综合以上结果,能看出DBA与DNA的体外嵌插结合强度更大。（3）共振光散射实验中,DBA-DNA体系作用的最适温度和p H条件分别为35°C、p H 7.4,此时DBA与DNA的结合饱和值为0.97。最适条件下,向反应体系中加入不同浓度的环境共存物,除氯化钠和氯化钙会降低DBA-DNA体系的共振光散射信号强度,亮氨酸、赖氨酸、十二烷基磺酸钠、葡萄糖、维生素C和尿素均能增强体系的共振光散射信号,并使结合饱和值增大。（4）磁珠吸附结合高效液相色谱测定实验中,当DNA用量为0.74μg时,对初始浓度为2.76×10-5mol/L的DBA去除率为91.82%。除氯化钠和氯化钙的存在不利于DNA对DBA的去除,其它环境共存物均对两者间的吸附去除有促进作用。对磁珠的重复性实验表明,实验所用磁珠至少能重复使用三次。综上所述,PYR和DBA都能与DNA在体外发生嵌插结合,但DBA与DNA的结合强度更大。对反应条件进行优化,能进一步增大DNA对DBA的吸附。本研究不仅有助于了解PAHs与DNA的体外相互作用机理,还能为建立一种基于PAHs-DNA嵌插结合去除环境中PAHs污染的新型消除方法奠定基础。
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