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目的转移相关基因1(metastasis-associated-gene1)MTA1是近年来发现的与肿瘤发生,侵袭及转移密切相关的基因,通过参与细胞核重构和脱乙酰基复合物(nucleosome remodeling and histone deaeetylase,NuRD)的组成,在细胞的信号转导,染色质重构,及转录的过程中发挥其生物学效应,进一步影响癌细胞的侵袭及转移能力。研究发现MTA1在肺癌、肝癌、胰腺癌、食管癌等多种恶性肿瘤中呈现高表达,且与其侵袭转移能力密切相关,但在子宫内膜癌中的研究目前国内外尚不多见,本研究通过研究不同子宫内膜组织中MTA1表达差异,通过siRNA(小干扰RNA)抑制MTA1在子宫内膜癌细胞系HEC-1-A中的表达,初步探讨MTA1在子宫内膜癌发生及侵袭转移过程中的作用,为子宫内膜癌的基因治疗提供新的靶点及理论依据。方法1.采用免疫组织化学SP法检测449例子宫内膜组织中MTA1的表达水平,其中正常子宫内膜组织100例,不典型增生子宫内膜组织49例,子宫内膜癌组织300例,卡方检验分析比较此三组MTA1表达水平差异,分析MTA1表达水平与子宫内膜癌分化程度、临床分期、肌层浸润深度的关系。2.通过脂质体介导方法,将特异性siRNA表达载体psilencer2.0-MTA1-siRNA转染入人子宫内膜癌细胞系HEC-1-A,以转染无关序列组psilencer2.0-neg及未转染组(non-transfected)做对照,将各组细胞进行常规培养。3.采用RT-PCR以及western-blot检测特异性siRNA对MTA1基因mRNA及蛋白表达的抑制效果。4.应用划痕损伤实验及transwell实验检测MTA1对子宫内膜癌细胞侵袭转移能力的影响,以及验证体外应用RNA干扰技术以MTA1为靶点抑制子宫内膜癌细胞侵袭及转移的可行性。结果1.MTA1在正常子宫内膜,不典型增生子宫内膜及子宫内膜癌组织中的表达水平存在明显差异,在癌组织中呈现显著的过表达,且与子宫内膜癌不同的组织学分级负相关,与不同的肌层浸润深度及临床分期中呈现正相关,且组间差异有统计学意义。2.RT-PCR结果显示,沉默MTA1基因后,其mRNA的水平显著降低,说明特异性的siRNA成功抑制了MTA1的转录,阻断了其mRNA的表达；western-blot结果显示,沉默MTA1基因后,其蛋白的水平显著降低,说明特异性的siRNA成功抑制了MTA1的翻译,阻断了其蛋白的表达。3.划痕损伤实验显示转染后划痕损伤愈合明显减慢,迁移率明显降低,transwell体外侵袭实验结果显示,转染后穿膜细胞百分率显著降。结论1.MTA1表达水平的增高与子宫内膜癌的发生、分化程度、临床分期及肌层浸润深度密切相关,可能在其发生发展过程中发挥着重要作用,有望成为预测子宫内膜癌发生及浸润转移的有效生物学标志,为子宫内膜癌的诊断及治疗提供依据。2.体外实验显示,应用脂质体介导的RNA干扰技术,可有效抑制MTA1在子宫内膜癌细胞中的表达,显著降低子宫内膜癌细胞的侵袭及转移能力,提示MTA1在子宫内膜癌的侵袭转移过程中发挥重要作用,可能成为子宫内膜癌治疗的潜在分子靶点。