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研究目的:目前,米非司酮治疗子宫肌瘤的研究已从临床观察进入到分子水平,为了进一步了解其机理,该研究:1.观察不同浓度米非司酮作用下体外培养的子宫肌瘤细胞的形态学变化,应用MTT法检测米非司酮对体外培养的子宫肌瘤细胞的生长情况,寻找治疗子宫肌瘤的最佳米非司酮浓度;2.探讨米非司酮治疗子宫肌瘤的分子机理;3:探讨米非司酮治疗子宫肌瘤与凋亡的关系.研究材料与方法:1.采用不同浓度米非司酮(10<-8>~10<-4>mol/L)加入体外培养的子宫肌瘤细胞中,培养3天,光镜下观察其形态学变化并照相,用MTT法测定不同浓度米非司酮作用三天后的肌瘤细胞生长情况,取10<-6>mol/L、10<-4>mol/L两组及对照组做电镜观察并照像.2.取对照、10<-6>mol/L、10<-4>mol/L三组在盖玻片上生长的肌瘤细胞,行免疫细胞化学法检测肌瘤细胞ER、PR、PCNA、VEGF、TGFβ、Fas、FasL、bcl-2、Caspase3的表达.3.应用酶联免疫法测三组肌瘤细胞分泌PRL的情况.4.应用流式细胞仪测三组肌瘤细胞的凋亡情况及细胞周期.结论:1、如采用适当浓度的消化酶,并掌握好消化时间,注意无菌操作,可提高子宫肌瘤体外培养的成功率.2、从光镜和电镜观察结果可见,米非司酮破坏肌瘤细胞结构,干扰核膜、胞膜、细胞器、及染色体,并与米非司酮浓度成正相关.3、通过MTT检测,10<-6> mol/L米非司酮浓度对肌瘤细胞有抑制作用,10<-4>mol/L抑制作用最强,这与文献报道一致.4、米非司酮下调ER、PR的表达,推测米非司酮缩瘤机制除了竞争性与PR和非竞争性抑制E2、P在子宫肌瘤中的作用外,还干扰PR、ER的表达.此种作用与浓度成正相关.5、米非司酮可直接抑制肌瘤细胞自分泌PRL的作用,推测通过干扰肌瘤细胞的自分泌/旁分泌而使肌瘤缩小,此种作用与浓度成正相关.6、米非司酮上调肌瘤细胞VEGF、TGFβ的表达,且只有达到10<-4>mol/L时才有显著差异,这与文献不一致.因文献中研究的是米非司酮对人体肌瘤的作用,推测VEGF、TGFβ的表达是否与肌瘤细胞萎缩变形有关,在人体内的作用可能与干扰E<,2>、P的活力而下调VEGF、TGFβ有关.7、米非司酮上调肌瘤细胞bcl-2、Fas及caspase3的表达,与浓度成正相关,且只有达到10<-4>mol/L时才有显著差异,推测米非司酮通过Fas/FasL、bcl-2、caspase3的相互作用而促肌瘤细胞凋亡.而流式细胞仪所测结果凋亡细胞并不多,是否与米非司酮对肌瘤细胞的作用时间较短,只引起细胞早期凋亡,DNA未解体,而流式细胞仪对此不灵敏所致.