TGFβ1、DNA-PKcs在宫颈癌组织及细胞株放疗前后蛋白表达变化与近期疗效的相关性初探

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目的:检测宫颈癌组织和宫颈腺癌Hela细胞株及鳞癌Siha细胞株在X线作用前后转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)和DNA依赖蛋白激酶的催化亚单位(DNAdependent protein kinase catalytic subunit,DNA-PKcs)蛋白表达水平变化,分析两种蛋白表达关联及与近期疗效的相关性。方法:1)收集未经手术治疗的宫颈癌患者放疗前及放疗10Gy时的宫颈癌组织标本,进行免疫组化染色及光密度分析,比较放疗前后宫颈癌组织中的TGFβ1和DNA-PKcs蛋白表达水平变化。同时观察放疗过程中患者的肿瘤消退情况,分析两种蛋白表达与近期疗效的相关性。2)用不同剂量(2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy)X线照射宫颈腺癌Hela细胞株和鳞癌Siha细胞株,行细胞免疫组化染色及光密度分析,比较TGFβ1和DNA-PKcs蛋白的表达改变,同时结合由肿瘤潜在倍增时间(Tumor potential doubling time,Tpot)绘制的细胞生长曲线和细胞克隆抑制率分析两种蛋白表达与细胞增殖的相关性。结果:1)12例宫颈癌组织放疗后TGFβ1蛋白表达升高(P<0.05), DNA-PKcs蛋白表达稍有下降,但未达到统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示放疗前两种蛋白表达无明显相关性(r=-0.156,P>0.05),放疗10Gy时两种蛋白表达也无明显相关性(r=-0.287,P>0.05),两者的表达和肿瘤半消时间及肿瘤全消时间亦无明显相关性。2)Hela和Siha细胞中TGFβ1和DNA-PKcs蛋白表达随X线剂量增加而增加,在6Gy时表达最强,后逐渐下降。Hela和Siha细胞中DNA-PKcs蛋白表达与Tpot成负相关(r=-0.817, P<0.05; r=-0.850, P<0.05),但TGFβ1蛋白表达与Tpot无明显相关性(r=-0.729, P>0.05; r=-0-440, P>0.05)。两种蛋白的表达在Hela细胞及Siha细胞无明显相关性(r=0.794,P>0.05;r=0.766,P>0.05)。Wilcoxon符号秩检验结果显示TGFβ1和DNA-PKcs蛋白在Hela细胞及Siha细胞中表达无明显差别(P>0.10)。细胞克隆形成实验显示两种细胞的增殖抑制率均随放疗剂量增加而逐渐升高。结论:1)宫颈癌组织中TGFβ1蛋白在X线照射后表达增加,DNA-PKcs蛋白表达改变不明显,两者间无明显关联,与近期疗效也无明显相关性。2)在Hela和Siha细胞株中,TGFβ1和DNA-PKcs蛋白表达水平与X线剂量成正相关。两种蛋白表达间无明显相关性。DNA-PKcs蛋白表达水平和Tpot成负相关,说明放疗过程中DNA-Pkcs的过表达可能与细胞的加速再增殖有关;而TGFβ1蛋白表达水平和Tpot无明显相关性,说明TGFβ1与放疗过程中细胞加速再增殖关系不明显。
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