ABA对悬浮培养匍枝筋骨草蜕皮激素的影响

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本文实验在匍枝筋骨草悬浮培养体系建立的基础上进行研究,分别向已培养7d的体系中添加不同浓度的脱落酸(ABA),根据悬浮细胞的生长状况、生物量以及蜕皮激素含量,筛选出最适宜添加浓度;分析ABA对匍枝筋骨草悬浮细胞内防御酶活性的影响、细胞内源激素以及中间产物的含量变化;并利用Illumina技术进行了转录组测序分析,了解匍枝筋骨草悬浮细包经ABA处理后的差异基因表达情况。通过生理生化实验以及ABA对匍枝筋骨草悬浮细胞分子应答情况,探讨匍枝筋骨草悬浮细胞生长的影响。  结果表明:添加0.15mg/LABA后细胞在未褐化期,培养液中糖的消耗量增加,蜕皮激素(20E)及蜕皮激素合成途径中间产物甲羟戊酸和角鲨烯的含量均有所上升;添加ABA后细胞内防御酶CAT、POD、SOD活性上升;添加ABA后细胞内的ZR、IAA、GA3含量呈下降趋势,而ABA含量呈升高趋势;经ABA处理后匍枝筋骨草细胞共154个基因表达有显著差异,上调表达的基因有99个,下调表达的基因有55个。与蜕皮激素合成相关的 ko00900萜类合成主干通路有6个基因差异表达,ko00100甾体合成通路有4个基因差异表达,ko00140甾体激素生物合成通路有6个基因差异表达:在添加ABA后的第4d时悬浮细胞出现了褐化现象。
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