【摘 要】
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为了解去神经海马发生的一系列可塑性事件的分子基础,我们运用cDNA芯片分析(cDNA microarry)方法对去内嗅皮层支配10天的大鼠海马的差异表达基因进行筛选。检测结果显示,6234
【出 处】
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中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）
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为了解去神经海马发生的一系列可塑性事件的分子基础,我们运用cDNA芯片分析(cDNA microarry)方法对去内嗅皮层支配10天的大鼠海马的差异表达基因进行筛选。检测结果显示,6234个基因和表达序列标签(ESTs)中,表达变化1.5倍以上的克隆152个,其中上调32个,下调120个。用Northern杂交和原位杂交方法对部分差异表达基因进一步鉴定,肯定了8个基因-MHC I, MHC II,β2-microglobulin , interferon-γreceptor ,thymosin-β4, gelsolin, profilin和SPARC在去神经海马的表达上调,与cDNA芯片分析相一致。原位杂交实验证实,这8个基因在去神经支配靶区-海马腔隙分子层和齿回外分子层特异性表达升高,说明它们可能参与去神经海马的结构可塑性事件。胞外基质糖蛋白SPARC具有抗细胞粘连和增殖的特性,表达于多种组织,调节细胞与胞外基质以及细胞之间的粘着。我们通过对SPARC mRNA和蛋白在去内嗅传入海马的表达变化研究,探讨其在中枢神经损伤引起的结构可塑性事件中的可能作用。Northern杂交结果显示SPARC mRNA在去内嗅皮层支配的海马瞬时性上调。原位杂交和免疫组织化学进一步证实SPARC mRNA和蛋白在去内嗅传入靶区-海马腔隙分子层和齿回外分子层的表达呈现瞬时性上调,即SPARC mRNA和蛋白信号在去神经传入后7天出现,15天和30天大量增加,60天恢复到正常水平。SPARC原位杂交和GFAP免疫组化双标,以及SPARC和GFAP蛋白的免疫荧光双标实验揭示表达SPARC的细胞为活化的星形胶质细胞。实验结果提示SPARC可能参
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