在查阅大量关于染料与蛋白质作用的文献基础上,提出了用对-二甲胺基亚苄罗丹宁（p-DBR）、对-氯酚偶氮罗丹宁（CPARH）、4-（2-噻唑偶氮）-1,3-二羟基萘（TADNm）、2-2’-苯并噻唑偶氮-1,8-二羟基-3,6-萘二磺酸（BTAC）等测定蛋白质的方法。 1.研究了蛋白质与p-DBR的结合反应,HSA浓度在3.6x10^-8mol·L^-1～1.0x10^-7mol·L^-1范围内,该反应符合Pesavento模式。反应的最佳条件为pH8.0,7.0x10^-5mol·L^-1p-DBR,1.25×10^-4mol·L^-1CTMAB,室温显色15min。在该条件下,HSA与p-DBR生成橙黄色复合物,最大吸收波长在480nm,表观摩尔吸光系数为3.4x10⁶L·mol^-1·cm^-1。该方法可用来测定生物样品中的蛋白质,线性范围为1.2mg·L^-1～11.0mg·L^-1,最低检测限为0.42mg·L^-1,回收率为95%～102%。 2.研究了蛋白质与CPARH的结合反应。反应的最适条件为:pH4.0,2.0×10^-4mol·L^-1CPARH,5.0x10^-5mol·L^-1CTMAB,室温显色15min。在此条件下,HSA与CPARH生成橙黄色复合物,最大吸收波长为460nm,表观摩尔吸光系数为4.7x10⁵L·mol^-1·cm^-1。利用该体系可测定蛋白质,线性范围为12.0mg·L^-1～96.0mg·L^-1。 3.研究了蛋白质与TADNm的结合反应。该反应在HSA浓度为3.6x10^-7mol·L^-1～8.1×10^-7mol·L^-1范围,符合Pesavento模式,最大结合数为212。显色反应的最适条件为pH5.0,1.5×10^-4mol·L^-1TADNm,0.0050%Triton X-100,室温显色10min。HSA与TADNm生成橙红色复合物,最大吸收波长在500nm,表观摩尔吸光系数为5.1×10⁵L·mol^-1·cm^-1。用HSA-TADNm复合物测定血清等生物样品中蛋白质时,线性范围为12.0mg·L^-1～48.0mg·L^-1,最低检测限为2.1mg·L^-1。 4.研究了蛋白质与BTAC的结合反应。该反应的最适条件为pH4.0,1.25×10^-4mol·L^-1BTAC,室温显色15min。HSA-BTAC复合物为紫红色,最大吸收波长为580nm,表观摩尔吸光系数为2.7×10⁵L·mol^-1·cm^-1。该方法可用来测定生物样品中的蛋白质,线性范围为48.0mg·L^-1～120.0mg·L^-1,最低检测限为8.0mg·L^-1。