目的 建立SD大鼠胶质瘤细胞(C6)HSP70蛋白表达最佳诱导条件；将高表达HSP70的灭活C6细胞体外刺激脾细胞以观察抗瘤效应，并初步研究其机理。 方法 用MTT法观察不同热休克条件和／或药物诱导下SD大鼠胶质瘤细胞(C6)生存率；用FCM法检测热休克组、榄香烯组、康莱特组、丝裂霉素组、榄香烯+热休克组、榄香烯+丝裂霉素组、榄香烯+康莱特+丝裂霉素组、热休克+康莱特组、热休克+康莱特+丝裂霉素组 C6细胞膜HSP70蛋白的表达。用MMC灭活热休克后的C6细胞作瘤苗抗原，体外刺激大鼠脾细胞，进行肿瘤杀伤试验。用MTT法检测其杀伤活性，FCM及电子显微镜观察并探讨有关杀伤机理。 结果 1，C6细胞在42℃、43℃休克0—12小时的过程中，其生存率无明显影响。而44℃、45℃休克条件下，不管休克时间长短，其生存率均受到明显影响(P＜0.05)。无论是何种药物，只要加上热休克43℃、2小时，对C6细胞的生存率的影响较单种药物同浓度要明显。2，C6细胞经43℃热休克1、2、4、6、8、10、12、14、16、20、24小时后，其胞膜HSP70蛋白表达率分别达到17.57％、28.19％、37.35％、 61．38％、73．19％、SS．61％、89．15％、70．18％、49．00％、40．17％、38．SS％。 均较对照组（乎均4．72们显著增高帜＜0．05厂 其中12小时表达率为 最高。榄香烯＋热休克组又较其他各组高。3，体外杀伤试验表明，经 热休克C6细胞刺激3、6、9天后的SD大鼠脾细胞较直接用C6细胞刺 激的SD大鼠脾细胞或新鲜SD大鼠脾细胞对热休克型C6细胞K3oC，12 ’J’时）或野生型C6细胞的杀伤率高，其中经热休克C6细胞刺激6大后 的SD大鼠脾细胞的杀伤率最高，它对热休克型C6细胞的杀伤率高达 99．25％，对野牛型C6纫胞也达63．10％（【：T＝20：1＊）。这种 杀恍活性 可被鼠HSP70单抗所阻断。4，杀伤试验时，FCM检测到亚二倍体峰， 电镜发现靶细胞出现凋亡小体。经热休克C6细胞刺激6天后的鼠脾细 胞对热休克型C6细胞及野生型C6细胞杀伤时瘤细胞凋亡分别达52．07％ 和 27．15％。 结论 一定条件下的热休克及某些药物可诱导C6细胞膜HSP70蛋 白的表达，其中单因素以43’C热休克12小时表达率为最高，多因素以 榄香烯叫3 OC热休克2小时表达率为最高。以HSP70蛋白高表达的灭活 C6瘤细胞作为瘤苗，其免疫原性增加。通过使靶细胞凋亡可能是这种 瘤苗主动免疫抗瘤效应的一个重要的杀伤机制。