红汁乳菇中化感物质的提取、分离、鉴定及生物活性测定

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红汁乳菇(Lactrius hatsudake)是红菇科、乳菇属中的一种美味食用菌。它能够与马尾松共生形成菌根,具有增强植物防病、抗污染、抗严寒、抗干旱的能力,能够促进林木生长,开发利用前景广阔。 本文对红汁乳菇乙酸乙酯提取物的化感作用进行了研究,分离、鉴定了乙酸乙酯提取物中主要的化感物质,定性分析了其抑菌活性。 1.采用溶剂极性梯度分离法得到红汁乳菇乙酸乙酯提取物,并用白菜和稗草作为受试植物进行化感作用研究,结果表明:乙酸乙酯提取物在1mg/ml时即能显著抑制和延迟稗草种子的萌发,发芽率为66%,发芽速度指数(IS)为418,当达到8mg/ml时,稗草种子发芽率为10%,IS为174;乙酸乙酯提取物在1mg/ml时即能显著抑制白菜和稗草幼苗根的生长,RI分别为-0.28、-0.29,当达到8mg/ml时,对白菜和稗草幼苗根长的RI分别为-0.90、-0.81;对白菜幼苗苗高表现出“低促高抑”的现象,乙酸乙酯提取物在1mg/ml时对白菜幼苗苗高有显著促进作用,RI为0.15,当浓度达到4mg/ml时,对白菜幼苗苗高有显著抑制作用,RI为-0.58,浓度达到8 mg/ml时,RI为-0.89,对稗草幼苗苗高在实验浓度范围内影响不明显。 2.采用柱层析和薄层层析分离方法并结合现代仪器分析手段对红汁乳菇乙酸乙酯提取部分中两种化感作用较强的化合物进行了分离纯化和结构鉴定,确定化合物Ⅰ为4-羟基-3-甲氧基-β-苯丙烯酸,化合物Ⅱ为2,4-二羟基苯甲酸。跟踪化感作用研究表明:化合物Ⅰ和化合物Ⅱ对白菜幼苗根长在100μg/ml时即有极显著的抑制作用,RI分别为-0.50、-0.58;化合物Ⅰ和化合物Ⅱ对白菜幼苗的苗高均表现出“低促高抑”的现象,100μg/mL时对白菜幼苗苗高有极显著的促进作用,RI分别为0.18、0.15,300μg/mL时对白菜幼苗苗高有极显著的抑制作用,RI分别为-0.28、-0.14。 3.采用牛津杯法定性研究了红汁乳菇乙酸乙酯提取物以及化合物Ⅰ和化合物Ⅱ对细菌和真菌的抑制作用。结果表明:乙酸乙酯提取物对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、红酵母(Rhodothece glutinis)有一定的抑制作用,对大肠杆菌(Escherichia coli)、青霉(Penicillium citrinum)、沙门氏菌(Salmonella spp.)、金黄色葡萄球菌(Staphaloccus aureus)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)有轻微抑制作用。化合物Ⅰ对大肠杆菌(E coli)、苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)具有明显的抑制作用,抑菌圈边缘清晰,对枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、沙门氏菌(Salmonella)、红酵母(R.glutinis)、啤酒酵母(S. cerevisiae)和青霉(p. citrinum)具有一定的抑制作用。化合物Ⅱ对青霉(p. citrinum)有轻微的抑制作用,对其它供试菌种均有明显抑制作用,抑菌圈边缘清晰。乙酸乙酯提取物的主要化学成分为酯类(32.95%)、脂肪酸类(25.03%)和酚类(17.33%)。
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