论文部分内容阅读
前言谷氨酸(Glutamate，Glu)为体内重要兴奋性氨基酸，是哺乳动物中枢神经系统中含量最丰富的兴奋性神经递质，参与神经系统多种重要功能的调节。Glu在神经末梢中储存于囊泡中，在突触传递中，Glu以胞吐形式释放，进而激活位于突触后的Glu受体。Glu受体激活后，再使相应的效应子发挥作用，从而改变细胞的膜电位和生化状态。Glu对于学习、记忆及神经传导等有着重要的作用。根据其与效应子间功能偶联的关系，Glu受体分为2种主要类型：离子型谷氨酸受体(ionotropic glutamate receptor，iGluR)和代谢型谷氨酸受体(metabotropic glutamate receptor，mGluR)。根据受体选择性激动剂的不同，将iGluR分为N-甲基D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate，NMDA)受体、a-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑(AMPA)受体和海人藻酸(kainate，KA)受体，后两种受体常合称为非NMDA受体。KA受体、AMPA受体通道维持平时的信息传递，而NMDA受体通道只在学习记忆过程中才开启，因此被认为是学习记忆中的关键物质。谷氨酸iGlu受体是由四个或五个亚基组成的寡聚体。每个NMDA受体上含有2个Glu和2个甘氨酸结合识别位点，Glu和甘氨酸均是受体的特异性激活剂。NMDAR包含2种亚基，NR1和NR2。NR2亚基分为4型：NR2A、NR2B、NR2C、NR2D。其中NR1可单独形成功能性纯寡聚体，但NR2亚基却不具备该功能。NNMDA受体在大脑皮层广泛分布，但密度最高的是海马CA1区，CA3区和齿状回为中等水平。谷氨酸NMDA受体中的GRIN2A亚基，又称NMDAR2A或GR2A，基因位于16p13.2，全长6293bp。GRIN2A基因存在多个变异点且具有遗传多态性，这些多态位点散布于各外显子和内含子内，其中SNP位点众多。本研究选择NMDA受体中的GRIN2A亚基基因3号内含子中的2个SNP位点rs17750303(A→C)和rs837690(A→G)，调查其在中国汉族群体中的遗传多态性，并探讨其应用。材料与方法根据目标序列设计引物，应用PCR技术扩增GRIN2A基因的SNP位点rs17750303和rs837690，利用BstNⅠ限制性内切酶进行消化，以聚丙烯酰胺凝胶电泳分离结合银染显带的方法，对139例中国北方汉族个体进行了基因分型。结果中国北方汉族139例血液样品，通过常规电泳法检测其基因型，rs17750303位点检出AA型31例，CA型60例，CC型48例。计算得出C等位基因的频率为0.561，A等位基因的频率为0.439。rs837690位点检出GG型51例，GA型50例，AA型38例。计算得出G等位基因的频率为0.547，A等位基因的频率为0.453。讨论通过电泳检测分型的方法对139例中国北方汉族血液样品进行了GRIN2A基因rs17750303和rs837690位点的遗传多态性检测，基因型频率分布符合H-W定律。rs17750303位点在中国北方汉族人群的DP值为0.645，H值为0.493，EPP值为0.187。rs837690位点在中国北方汉族人群的DP值为0.661，H值为0.496，EPP值为0.186。它们在中国北方汉族群体隶属高等鉴别能力的遗传标记系统。结合北美群体的数据，经过统计学X~2分析，rs17750303多态性分布在中国北方汉族群体与北美群体间有显著性差异(P＜0.05)。结论1.GRIN2A基因2个SNP位点rs17750303和rs837690在中国北方汉族群体中具有较好的遗传多态性分布，在法医学个体识别和亲子鉴定中具有较高的应用价值。2.GRIN2A基因rs17750303位点可作为人类遗传学研究的指标之一。