蒙药广枣及其标准提取物的质量控制方法研究

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广枣(Fructus Choerospondiatis)为蒙医习用药材,是漆树科植物南酸枣Choerospondias axillaris(Roxb.)Burtt et Hill的干燥成熟果实。广枣作为蒙药被收载在《中华人民共和国药典》2015版中。广枣性味干、酸、平,用于气滞血瘀,胸痹作痛,心悸气短,心神不安,等,在蒙医药中有广泛用途。  目的:本文对蒙药广枣药材的质量控制方法进行研究,并将广枣药材制备成广枣标准提取物进行质量控制方法研究;比较广枣药材及其标准提取物,明确广枣标准提取物有富集总黄酮的作用,从而全面有效的控制广枣药材及其标准提取物的质量,为蒙药材广枣的研发、应用提供参考和依据。  方法:首先采用紫外可见分光光度法测定广枣中总黄酮的含量,采用HPLC对广枣中槲皮素、没食子酸的含量进行测定,并建立以总黄酮为指标的不同批次的广枣药材的HPLC指纹图谱;其次,本实验以总黄酮的含量为评价指标,采用正交试验设计法,优化广枣标准提取物的提取工艺,并进行大孔树脂的吸附层析处理,优化广枣标准提取物的纯化工艺,制得10批次蒙药广枣的标准提取物;再次,采用与广枣药材相同的方法,对广枣标准提取物中总黄酮的含量、槲皮素、没食子酸三种成分的含量进行测定,并建立不同批次广枣标准提取物的HPLC指纹图谱。最后,比较广枣药材及其标准提取物中槲皮素等成分的含量和HPLC指纹图谱,分析广枣标准提取物的优势。  结果:(1)采用HPLC法测定蒙药广枣药材中槲皮素的含量,线性范围为0.0284μg-0.3692μg,r=0.9999(n=6),平均回收率为100.3%,RSD为1.05%(n=6)。(2)采用HPLC法测定蒙药广枣药材中没食子酸的含量,线性范围为0.0192μg-0.2112μg,r=0.9999(n=6),平均回收率为102.0%,RSD为1.20%(n=6)。(3)采用HPLC法建立广枣药材指纹图谱,应用中药指纹图谱相似度评价软件,共获得8个共有峰,相似度计算结果均大于0.95。(4)本文确定广枣标准提取物的制备方法,并制备了10批广枣标准提取物。(5)采用HPLC法测定广枣标准提取物的槲皮素等成分含量,并建立其指纹图谱。  结论:(1)建立蒙药广枣药材中槲皮素等成分的含量测定方法,准确度高,重复性好,可用于广枣药材中槲皮素等成分的含量测定。(2)建立广枣药材HPLC指纹图谱,可用于广枣药材的质量控制。(3)建立广枣标准提取物中槲皮素等成分的含量测定,并建立其HPLC指纹图谱。(4)比较广枣标准提取物与广枣药材中化学成分的含量,发现广枣标准提取物中总黄酮、槲皮素、没食子酸的含量都有明显的提高;比较广枣标准提取物与广枣药材的指纹图谱,发现广枣标准提取物的指纹图谱中共有峰无缺失,能够体现广枣药材指纹图谱的特征。可以初步判断,D101大孔树脂能够富集广枣药材中总黄酮等成分,该制备方法可用于广枣标准提取物的制备。
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