【摘 要】
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猫泛白细胞减少症(feline panleukopenia,FP)是由猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus,FPV)引起的高度接触性传染病,以白细胞的严重减少和出血性肠炎为典型特征。该病呈世界范围流行,对宠物猫及野生猫科动物构成巨大威胁。FPV是一种无囊膜的单链DNA病毒,基因组两端含有发卡结构,中间部分编码两种蛋白:非结构蛋白(NS1、NS2)和结构蛋白(V
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猫泛白细胞减少症(feline panleukopenia,FP)是由猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus,FPV)引起的高度接触性传染病,以白细胞的严重减少和出血性肠炎为典型特征。该病呈世界范围流行,对宠物猫及野生猫科动物构成巨大威胁。FPV是一种无囊膜的单链DNA病毒,基因组两端含有发卡结构,中间部分编码两种蛋白:非结构蛋白(NS1、NS2)和结构蛋白(VP1、VP2)。本研究分离了一株FPV,并进行了生物学特性、基因组分析及VP2优势抗原区的原核表达,为研究北京地区FPV毒株的流行变异奠定基础。 本研究从某动物医院一例FPV胶体金试纸条检测为强阳性的患病猫的粪便中分离到一株病毒,在CRFK细胞上盲传5代后,可以观察到明显的病变。经间接免疫荧光试验(IFA)、电镜观察及分子生物学等试验鉴定后,证实为FPV,命名为BJ04株。经动物感染试验证实该毒株能引起典型的临床症状和组织病理学变化。对病毒的全基因组进行克隆和序列测定,利用DNAstar软件对BJ04株与GenBank上公布的FPV、犬细小病毒(CPV)和水貂细小病毒(MEV)共28株细小病毒的VP2基因进行分析,发现BJ04株与其余27株的核苷酸同源性为98.3%~99.9%,氨基酸同源性为97.3%~100%;其中BJ04株VP2蛋白上的6个关键氨基酸与其他FPV毒株一致,也证实BJ04株的宿主为猫;利用DNAstar软件对BJ04株与GenBank上登录的FPV、CPV和MEV共26株细小病毒的NS1基因序列比较,显示核苷酸同源性为98.5%~99.9%,氨基酸同源性为98.1%~99.9%。 使用生物信息学软件对B J04株的VP2蛋白进行了抗原表位预测,确定了VP2蛋白上的第307~408位氨基酸为优势抗原区域,对该区域的基因进行原核表达。蛋白纯化后,进行Western blot试验,结果表明表达的重组蛋白具有很好的反应活性。
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