乌头汤记载在《金匾要略》,是东汉时代著名医学家张仲景创制的一首名方,具有温经祛寒,除湿止痛的功效,主治寒湿痹证。著名老中医李可先生在其基础上加上黑豆及防风,以达到制约制川乌的毒性,在临床上广泛应用于治疗类风湿性关节炎、腰椎间盘突出症、肩关节周围炎等现代医学的疾病,并具有良好的疗效。本课题分别从药效学和化学成分分析角度,展开乌头汤及李老改良之乌头汤不同配伍的减毒增效比较研究,筛选出优选方,同时对优选方进行提取工艺优化及建立HPLC指纹图谱,并通过谱效结合研究优选方抗类风湿关节炎的药效物质基础。研究过程及结果如下：1优选方筛选采用高效液相色谱法测定两方不同配伍中3种单酯型乌头生物碱(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)的含量。采用醋酸造成小鼠扭体模型,比较两方的镇痛差异,通过小鼠急性毒性试验来评价两方毒性的差异。结果表明,与制川乌单煎相比,李老改良之乌头汤与乌头汤中的单酯型乌头生物碱含量由1.339mg分别降低到0.349mg,0.402mg,制川乌配伍防风降低到0.680mg,制川乌配伍黑豆降低到0.668mg,制川乌配伍炙甘草降低到1.002mg;李老改良之乌头汤与乌头汤的3个剂量组均明显减少了醋酸致小鼠20min内扭体次数(p<0.05或p<0.01),但两方比较没有显著性差异；两方均无急性毒性反应；综上所述,本课题确定李老改良之乌头汤作为优选方。2优选方提取工艺研究提取工艺通过正交实验考察了盐酸麻黄碱、芍药苷、3种单酯型乌头生物碱(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)保留率及出膏率的影响,对结果进行加权评分分析,最终确定提取工艺参数：以水为溶媒回流提取2次,每次1h,溶媒倍量为10倍、8倍。3优选方谱效关系研究以高效液相色谱法建立了优选方特征HPLC指纹图谱,对主要特征色谱峰来源进行了归属,并确定了其中5个特征色谱峰的成分,分别为：盐酸麻黄碱、芍药苷、甘草苷、苯甲酰新乌头原碱、甘草酸铵。CIA模型大鼠右后足足掌厚度的变化与病理切片均反映优选方拆方各组对CIA模型大鼠产生的慢性炎症有不同程度缓解作用,其中全方效果最佳。利用双变量相关分析法对优选方各配伍组特征HPLC指纹图谱与抗炎作用进行相关分析,发现15个色谱峰与炎症抑制作用呈正相关,3个色谱峰成负相关；有4个色谱峰与炎症抑制作用呈显著性相关(P<0.05或P<0.01),分别来自于优选方中的制川乌、麻黄、白芍药材。