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目的采用不同浓度的槟榔碱处理3T3-L1前脂肪细胞，观察它对脂肪细胞分化的影响，并初步探讨其机制。方法(1)采用MTT(噻唑蓝, Methylthiazolyl tetrazolium)法检测槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞的细胞毒性作用。(2)用传统的“鸡尾酒”法(即含胰岛素、地塞米松和异丁基甲基黄嘌呤(isobutyl methyl xanthine, IBMX)的混合诱导剂)将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化，在诱导分化的第0天用或不用100μmol/L槟榔碱处理72h，于诱导分化的第9~11天，用油红O染色，观察拍照，并用异丙醇提取脂质吸附的油红O染料，测定OD值以定量脂质含量。(3)在诱导分化第3天和第11天，提取细胞的总RNA，RT-PCR检测3T3-L1前脂肪细胞分化相关基因表达，包括诱导分化早期基因Pref-1(前脂肪细胞因子,preadipocyte factor1,)、C/EBPα和C/EBPβ(CCAAT增强子结合蛋白α和β, CCAAT-enhancer binding protein-alpha and beta)，脂肪生成相关基因Fas (脂肪酸合成酶,fatty acid synthase,)、adrp(脂肪分化相关蛋白, adipose differentiation-related protein/adipophilin)和plin (围脂滴蛋白, perilipin)，诱导分化成熟标志基因PPARγ2(过氧化物酶体增殖物激活受体, peroxisome proliferator-activated receptor gamma2)、Glut4(葡萄糖转运体4, glucose transporter type4)。结果(1)槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞具有一定的细胞毒性。在0-800μmol/L浓度范围内细胞相对存活率随浓度增大而明显降低，具有浓度依赖性。100μmol/L槟榔碱处理3T3-L1前脂肪细胞24h、48h、72h和96h，细胞存活率之间无明显差异，约为70%。当槟榔碱浓度≥200μmol/L时，槟榔碱处理48h、72h、96h细胞存活率均显著低于24h，均小于20%，而48h、72h和96h之间的细胞活性无显著性差异。(2)油红O染色显示槟榔碱处理组(Are,100μmol/L Arecoline)中含有“戒环”样脂滴成熟脂肪细胞的数目明显少于对照组(Control,0μmol/LArecoline)。脂肪细胞脂质含量定量结果显示：槟榔碱处理组脂质含量较对照组减少24.2%。(3)100μmol/L槟榔碱对前脂肪细胞因子Pref-1基因表达无显著影响，但可显著降低诱导分化第3天和11天的C/EBPα和C/EBPβ基因表达。在诱导分化第3天和第11天，与对照组相比，槟榔碱处理组C/EBPα基因表达水平分别降低10.7%和7.6%；而C/EBPβ基因表达水平分别降低13.8%和40.5%。(4)100μmol/L槟榔碱不影响脂肪酸合成酶基因Fas的表达，但显著降低Adrp和plin的mRNA水平。在诱导分化第3天和第11天，与对照组相比，槟榔碱处理组Adrp基因表达水平分别下降17.8%和5.1%；而plin基因表达水平分别下降9.2%和15.0%。(5)随着3T3-L1前脂肪细胞分化成熟，脂肪细胞分化成熟基因PPARγ2和Glut4的表达水平显著升高，但100μmol/L槟榔碱可显著降低PPARγ2和Glut4的表达。在诱导分化第3天和第11天，与对照组相比，槟榔碱处理组PPARγ2的基因表达分别减少21.9%和26.2%；而Glut4基因表达分别减少12.2%和43.9%。结论槟榔碱可显著抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化成熟，其机制可能与其下调C/EBPα基因和C/EBPβ基因、 Adrp基因和plin基因、PPARγ2基因和Glut4基因的表达有关。