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低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)是由低密度脂蛋白受体基因编码的一种跨膜糖蛋白,属于低密度脂蛋白受体家族的一员。细胞可通过LDLR介导低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)内吞来获得外源胆固醇。因此LDLR在调节血液中胆固醇的含量方面具有重要的作用。LDLR突变或功能缺失是导致正常机体血液中胆固醇含量升高的重要原因,机体中胆固醇的代谢紊乱会导致一系列严重的疾病,例如心血管疾病、动脉粥样硬化和胆结石等。有证据表明肥胖症、糖尿病和阿尔海默氏病(Alzheimer’s Disease)也与胆固醇代谢的紊乱有关。在研究这些疾病详细发病机理的过程中,通常需要检测细胞中LDLR的含量变化,因此制备出高效的LDLR抗体就变得非常的有意义。本实验以pmLDLR-5×Myc质粒中的鼠源LDLR基因为模板,经过PCR扩增后得到LDLR-C(813-862aa)基因片段,克隆于蛋白表达载体pGEX-6P-1中,得到重组质粒pGEX-6P-1-LDLR-C,并将其转化到大肠杆菌BL21细胞中,经过IPTG诱导表达,得到了带有GST标签分子量大小约为32 KD的LDLR抗原蛋白。表达产物经纯化和定量分析之后免疫新西兰大白兔,收集血清进行抗体特异性检测。结果显示,成功构建了 LDLR-C融合基因的原核表达质粒,获得了 LDLR抗原蛋白,以此蛋白免疫动物可产生特异性强的抗体。再经过亲和纯化,将抗体进行免疫荧光检测,最终实验结果表明LDLR多克隆抗体的制备是成功的,纯化后的抗体可以用来进行Western Blot实验以及免疫荧光实验。LDLR多克隆抗体成功的制备,为今后LDLR的表达分布检测、细胞内定位及与其它蛋白质间相互作用等许多研究工作的开展奠定了基础。