猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED)是分别由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的消化道传染性疾病，具有急性、高接触性的特点。TGE和PED的临床症状都表现为腹泻、呕吐、脱水等，均可导致仔猪死亡和成年感染猪机体消瘦、降低饲料效率、增加养殖成本，给养猪业带来巨大的经济损失。目前，疫苗接种是控制这两种疾病的有效方法。研制针对性强的流行毒株的疫苗对于控制两种疾病具有现实意义。为此，本试验用TGEVA/E毒株和PEDV A/D毒株，初步研制了猪传染性胃肠炎与猪流行系腹泻二联灭活疫苗，并对其免疫效果进行了初步研究。　　为研究TGEV A/E毒株在P K-15细胞上的增殖动态，将TGEV接种到PK-15细胞上，分别在接毒后的0h、8h、16h、24h、32h、40h、48h、56h、64h、72h、80h收取细胞液和上清液，每检测点设3个平行对照，通过测定不同时间病毒的TCID50，整理数据后绘制TGEV在 PK-15细胞上的增殖曲线。结果表明，TGEV接种到 P K-15上后，48h时达到增殖高峰（TCID50为10-6.83/mL），后可持续到接毒后56h，病毒的TCID50可达到10-6.5/mL以上。表明在PK-15上增殖的TGEV可在48-64h时间收获病毒。　　利用TGEV A/E毒株和PEDV A/D毒株作为制备二联灭活苗的疫苗株，分别在PK-15细胞和VE RO细胞上进行传代培养，扩增出高滴度的病毒液，制备成二联油乳剂灭活疫苗，并添加原核表达的PED V流行毒株S基因前1077个碱基表达的蛋白S A，进行疫苗的物理性状、无菌检验和安全检验和动物免疫试验，分别通过微量血清中和试验和 ELI S A试验检测免疫后仔猪体内的抗体水平并采用spss l7.0统计学软件对检测数据进行处理和统计分析。结果显示：该疫苗物理性状等检验均合格；对小鼠和猪安全无副作用；将TGE-PED二联灭活苗分高、中、低剂量免疫猪后发现高、中剂量组之间抗体水平接近，两组数据均明显高于低剂量组且差异显著（P<0.05），确定该二联苗最佳免疫剂量为2mL/头；TGEV抗体在二免四周时抗体水平达到最高，中和抗体检测结果和ELISA抗体检测结果分别为1:319和1：1280，PEDV抗体在二免三周时抗体水平达到最高，中和抗体检测结果和 ELISA抗体检测结果分别可高达1:512和1：1600，分别与相对应的TGEV（1:319和1:1280）及PEDV（1:512和1:1600）单苗的抗体水平相当，差异不显著（P>0.05），但均高于商品苗的抗体水平；SA蛋白可以诱导产生的PEDV抗体水平较低，而添加SA蛋白的二联苗+PED SA蛋白组的抗体水平整体上要优于TGE-PED二联灭活疫苗组；微量血清中和试验和ELISA试验检测结果所绘制的抗体消长曲线基本一致，两者均显示TGEV和PEDV的较高抗体水平均可持续到二次免疫后三个月。以上结果提示，本研究研制的TGE-PED二联疫苗效果确实，为实际生产中防控二种疾病提供了可选疫苗。