肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是常见的恶性肿瘤，发病率逐年上升。HCC早期症状隐匿，病情发展迅速，早期诊断很困难，导致肝癌手术切除率低，复发率高，化疗不敏感，总体治疗效果欠佳。 尽管流行病学调查发现HCC与肝炎病毒感染、肝硬化、长期接触化学物质如黄曲霉素B1等因素相关，但其发病的分子机制仍然不清楚。目前HCC的治疗以手术和化疗为主，缺乏靶向性治疗措施，不能显著延长HCC患者生存时间。因此，迫切需要加强HCC分子发病机制的研究，确定涉及HCC的特异性信号通路，以建立新的有效的靶向性治疗策略。 Hedgehog(Hh)信号通路由3种Hh蛋白(配体)、2个跨膜蛋白受体包本研究结果发现Hh信号通路分子在HCC中高表达。因此，我们设想Hh信号通路在肝癌组织异常激活，促进肿瘤细胞的增殖和凋亡抵抗，可能是肝癌治疗的靶点。 第一章Hedgehog信号通路分子在肝细胞癌和肝癌细胞株的表达 　　目的：探讨Hh信号通路分子在HCC组织、癌旁组织中的表达差异；筛选出表达Hh信号通路分子的肝癌细胞株。 方法：应用RT-PCR方法检测7例HCC标本、3个肝癌细胞株和1个正常肝细胞株的Hh信号通路分子；利用组织芯片对100例HCC和相应癌旁进行Gli-1和Shh检测；应用免疫细胞化学和免疫荧光方法检测Gli-1的表达。 结论：Hh信号通路主要以配体依赖方式在HCC组织异常激活。 第二章 Hedgehog信号通路对HCC细胞生存的影响及其机制 　　目的：探讨Hh信号通路对}tCC细胞株生存的影响和机制。 方法：应用MTT和台盼兰染色细胞计数的方法检测细胞活性；用Annexin v和PI双标的方法和Hoechest 33258染色分别利用流式细胞术和荧光显微镜检测细胞凋亡；Gli-1和Bcl-2家族mRNA的表达用RT-PCR方法检测，Bel-2蛋白水平和细胞周期应用流式细胞术和western blot检测，Caspase 3和Caspase 9活性用光化学检测和western blot检测，应用siRNA干扰技术明确Gli-1和Bcl-2在Hh信号通路中的作用。 结论：Hh信号通路异常激活对促进肝癌细胞增殖、和逃逸凋亡起重要作用；抑制Hh信号通路可下调Bcl-2从而诱导HCC细胞凋亡，Hh信号通路可望成为治疗肝癌的理想靶点。