CCDNBP1/GCIP/HHM/GIP1是一个人源的核内蛋白,在细胞的增殖与分化发挥重要作用。2000年,Terai et al.,Chunzhi et al.和Yao et al.分别发表了三篇文章,几乎在同一时间发现了CCNDBPl(Cyclin D-type binding protein1),并分别将其命名为HHM(human homologue of Maid)、GCIP(Grap2 Cyclin-Dinteracting protein)、DIP1(D-type Cyclin-interacting protein)。CCNDBP1能与细胞周期调控因子Cyclin D相互作用并抑制后者的活性,同时它还能与Grap2发生作用,暗示其在细胞免疫调节过程中可能起着重要的作用。大量实验数据表明,CCNDBP1能抑制多种肿瘤的生长,是肿瘤细胞发生过程中的重要调节因子。然而,我们对CCNDBP1的具体作用机制了解并不多。因此,通过CCNDBP1的晶体学结构研究,将有助于我们深入研究其作用机理。这对我们深入了解和防治肿瘤这一人类重大科研难题具有非常重要的意义。　　 本实验对人源蛋白CCNDBP1进行了克隆、表达、纯化、结晶,以及结晶条件的筛选和对晶体生长条件的优化工作。实验以插入有目的基因的pGEX-6p-1载体转化基因工程菌E.coliBL21,表达目的蛋白;通过GST亲和层析柱,Mono-Q阴离子交换柱,分子筛等方法进行蛋白纯化;利用Hampton research screen kits进行初步晶体筛选;之后对晶体生长条件进行优化,包括沉淀剂浓度、PH梯度的筛选,以及筛选添加剂试剂盒。截止到2010年10月份,通过对NCBI数据库的搜索得知,CCDNBP1以及其同源性蛋白的晶体结构都还没有被解析。我们拿到的CCNDBP1晶体,其初步X射线衍射分辨率为7(A),为其后续的晶体结构学研究打下了坚实的基础。　　 本文还包含了作者的另一部分工作,即在人类基因库中选取了一些基因,进行克隆表达并纯化。该人类基因库中有将近2万个基因,我们从大约3000个基因中选择了约150个基因。利用不依赖于连接的克隆(LIC,ligation independentcloning)和传统的双酶切方法,最终得到可在大肠杆菌中表达的蛋白约30个。　　 该工作为这些蛋白后续的纯化以及晶体筛选奠定了基础。