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目的:对药材进行生药学鉴别研究;初步建立牛大力薄层色谱鉴别方法;采用紫外分光光度法测定牛大力药材中多糖的含量;建立HPLC测定牛大力药材中芒柄花素、高丽槐素两种成分的含量的方法;建立牛大力药材HPLC指纹图谱分析方法。科学评价并有效控制牛大力药材质量,为牛大力药材质量标准提高提供科学的依据。
方法:对牛大力药材进行基源、性状、显微鉴别;建立牛大力多糖提取方法,紫外分光光度法测定多糖的含量:以葡萄糖为对照品,对其进行显色,在628nm波长处测定吸光度,测定牛大力药材中多糖的含量;HPLC法测定芒柄花素、高丽槐素的含量:采用DiamonsilC18(2)柱(5μm,4.6×250mm),流动相为乙腈-0.1%冰醋酸(38∶62),流速1.0mL·min-1,检测波长为0-18min∶248nm,18-25min∶310nm,柱温为35℃;HPLC法建立指纹图谱:采用反相高效液相色谱法,采用DiamonsilC18(2)柱(5μm,4.6×250mm),乙腈-0.1%冰醋酸溶液梯度洗脱,流速0.8mL·min-1,检测波长0-42min∶248nm,42-45min∶310nm,45-70min∶248nm,柱温为30℃。
结果:对药材进行了生药学鉴别研究;初步建立的牛大力薄层色谱鉴别简便可靠;紫外分光光度法测定牛大力药材中多糖的含量:线性范围为0.007542~0.020112mg·mL-1(r=0.9993),平均回收率为102.2%,RSD为1.70%; HPLC法测定芒柄花素、高丽槐素的含量:芒柄花素的进样量分别在0.0023~0.0600μg的范围内具有良好的线性关系,平均回收率为100.0%,RSD=2.00%(n=6)。高丽槐素的进样量在0.0391~1.0156μg的范围内具有良好的线性关系,平均回收率为100.6%,RSD=0.70%(n=6)。HPLC法建立指纹图谱:以高丽槐素为参照峰,生成牛大力药材对照指纹图谱共有模式,建立了13个共有峰,各共有峰相对保留时间的RSD值均小于0.7%,与对照图谱相比较,样品指纹图谱相似度均在0.85以上。
结论:对药材进行了生药学鉴别研究;本研究初步建立牛大力薄层色谱鉴别方法,采用紫外分光光度法测定牛大力药材中多糖的含量,以及采用高效液相色谱法测定芒柄花素、高丽槐素的含量;建立比较科学的质控方法及质量评价标准,为牛大力质量标准的建立提供了研究依据。