二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,EC1.5.1.3)是核酸代谢的关键酶，可将二氢叶酸催化生成四氢叶酸（DFFA）,而四氢叶酸在嘌呤核苷酸代谢中参与了DNA、RNA的合成，所以该酶可促进细胞的裂解增殖。控制四氢叶酸的生成，成为治疗癌症药物的主要研究方向，二氢叶酸还原酶便成为抗癌药物的主要靶酶。本文运用紫外分光光度法对二氢叶酸还原酶抑制剂进行了筛选并建立了固定化抗癌药物筛选体系。本论文应用紫外分光光度法对12种人工合成的二氢叶酸还原酶抑制剂进行选择，通过数据比对CM2、BP1、BP7、CA9、BPF1、BPF2、HS11，7种抑制剂对应的决定系数分别为：0.8507、0.8109、0.9931、0.9671、0.95、0.9651、0.9434，且每个测量值分布具备较好的线性关系相较于另5种抑制剂：CI5、CI8、CI9、BPF3、TV9认为前者具备抑制作用。从人的肝脏中提取酶,将实验中筛选出的抑制剂作用于人二氢叶酸还原酶,观察发现BPF1、CA9在动物源酶和人源酶实验中相关系数都在0.9以上，分别为：0.9873、0.9640。但是CA9的抑制能力微弱，所以确定了BPF1为本论文选定的抑制剂。对二氢叶酸还原酶的固定化条件、稳定性进行了研究，并对交联包埋和包埋交联两种固定化方法进行分析，结果显示包埋交联的固定化酶活性高，且在戊二醛浓度4%时活性最高，所以选则包埋交联法固定化二氢叶酸还原酶。利用BPF1构建抑制剂-固定化酶的体系，其决定系数为0.9523，证明该抑制剂可以有效的与固定化酶结合。为二氢叶酸还原酶成为一种新型的抗癌药物体外检测试剂提供了依据。