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果树自然变异丰富了野生种质资源,为生产上选育优良新品种及果树特异性状基因位点的研究提供了宝贵材料。果肉全面着红色的猕猴桃为一稀有种质资源,国内外尚未见报道;早熟水蜜桃货架寿命短,选育成熟期推迟的新品种(系)具有重要推广价值。本研究对红阳猕猴桃全红型芽变系(86-3)及早熟桃“早霞露”(CK)的晚熟型芽变(Pv)进行了品质、POD和EST同工酶电泳及RAPD等方面的分析,建立了一套可供生产上借鉴的预测芽变苗木的技术方法。主要结果如下: 1 猕猴桃86-3果实全面着红色,且内、外层花青素含量均极显著高于原品种红阳,其变异性状稳定。除果个略小外,86-3其它品质俱佳,为一优良变异。 桃芽变(Pv)果实成熟期较原品种“早霞露”推迟7~8天,品质优于“早霞露”,有市场潜力。 2 猕猴桃86-3与红阳花粉直径都在10~25μm之间,均为三沟型小花粉,但两者花粉大小、形状、P/E值及表面纹饰都有所不同。花粉的形态受基因控制,而受外界条件的影响小,86-3与红阳花粉的差异反映了86-3遗传物质上的变异。 3 叶片POD和EST同工酶电泳结果表明猕猴桃86-3酶带较红阳增多。其中,POD增加4条,Rf分别为0.38、0.42、0.48、0.67,另有一条酶带(Rf0.09)活性较红阳弱;EST增加两条(Rf0.52、Rf0.55),此外86-3还有4条酶带活性比红阳强得多。POD、EST同工酶电泳图谱可以区分86-3与原品种。 桃芽变与原品种相比,EST同工酶在B区少了Rf0.43带,在A区多一条Rf0.26带,其它酶带活性降低;两者POD同工酶图谱基本一致。 酶是基因的表达产物,同工酶带的差异反映出所检测同工酶基因组成或表达上的变化。对本研究而言,POD、EST同工酶分析均适于猕猴桃,而只有EST适用于桃。 4 以86-3与红阳为材料对300条单引物进行了筛选,得到10条(S107、S84、S157、S27、S188、AY17、AY5、R11、AV9、AM11)在两个样品间的扩增有多态性片段。10条引物共扩增出148个片段,其中多态性片段为20个,占13.5%,表明86-3果肉颜色的变化与遗传物质的改变密切相关,同时也说明86-3中遗传物质发生较大变异。用S107、S84、S157、AY17四条引物分别对不同树龄、不同砧木的86-3嫁接单株与红阳进行RAPD扩增,各单株的特异性片段同引物筛选中得到的一致,预示各嫁接单株果实全红。后对其成熟果实进行了调查,果肉确实全面着红色,与RAPD分析预测结果吻合。因此所得特异性RAPD片段可用于全红芽变嫁接苗木纯度的早期鉴定。 5采用300多条单引物及108个混合随机引物对桃芽变(PV)及CK进行扩增,结果除引物5465在扩增片段上有童的微小差异外,绝大部分完全一致。说明选用的引物的结合位点基本未与遗传物质中发生变化的区域结合,说明该芽变可能属于基因突变型,有关突变位点的研究有待进一步进行。