CD47抗体靶向引导近红外分子成像诊断上尿路上皮癌的体外实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:AliceXQ
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目的:研究CD47作为人上尿路上皮癌(UTUC)光学分子成像靶点的可行性,并进行初步的体外成像实验。探讨从细胞和分子水平精准诊断UTUC的新技术。方法:(1)基因表达综合(GEO)数据库下载UTUC全基因组转录组测序数据,共纳入90例肿瘤样本和10例癌旁正常样本,R软件包鉴定差异表达基因(DEG);(2)收集我院2018年8月到2020年9月手术治疗的57例UTUC和20例同期癌旁正常尿路上皮的组织石蜡标本进行免疫组织化学染色,评估CD47在蛋白水平的表达及分布特点;(3)从2020年9月到2021年3月,12例新鲜离体的根治性肾输尿管全长切除术(RNU)标本被纳入体外成像实验。新鲜离体的RNU标本即刻与抗-CD47-Alexa Fluor 790靶向示踪剂孵育30分钟,生理盐水冲洗三次后置于白光和近红外光下成像。分析肿瘤组织与正常组织的平均荧光强度(MFI),计算肿瘤-背景比(TBR)。结果:(1)按照P<0.01和|log2FC|>1的标准,GEO数据共鉴定出5421个DEG,其中CD47 m RNA在UTUC中的表达明显高于正常组织(P<0.001,|log2FC|=1.43);(2)免疫组织化学染色结果显示,非肌层浸润性UTUC(n=21)和肌层浸润性UTUC(n=36)的CD47表达水平均高于正常尿路上皮(n=20)(P<0.01),表达部位为肿瘤细胞的细胞膜;(3)在体外成像实验中,12例患者均经病理学检查证实为UTUC。近红外光下,肿瘤组织的荧光信号明显高于癌旁正常组织(MFI分别为54.67±16.17和19.11±6.41,P<0.001),TBR为1.7~4.09。结论:基于CD47抗体靶向引导的分子荧光示踪剂能够与UTUC细胞膜高表达的CD47分子特异性结合。在CD47靶向近红外分子成像下,视觉图像的对比度明显增强,有助于肿瘤的实时诊断。
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