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目的:研究胶原蛋白壳聚糖纳米银烧创伤抗菌敷料的性能,观察其主要成分对血管内皮细胞增殖及其分泌生长因子、炎症因子的影响,探讨其对深II度烫伤创面愈合的作用。方法:1体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),按组成敷料的不同成分分为六组,胶原蛋白壳聚糖混合液组、小分子胶原蛋白溶液组、小分子壳聚糖溶液组、大分子胶原蛋白溶液组、大分子壳聚糖溶液组、纳米银溶液组,每组分别设置一系列浓度梯度。MTT法检测各组不同浓度对HUVECs增殖的影响;根据生长曲线,选取各组中对细胞增殖的最适浓度与细胞作用48h后,ELISA法检测细胞上清液中生长因子(VEGF、EGF、PDGF、TGF-β1、b FGF)及炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8)的水平。2扫描电子显微镜和X射线衍射仪观察胶原蛋白壳聚糖纳米银敷料结构以及其表面纳米银的分布;电感耦合等离子体质谱仪分析敷料中纳米银的释放情况;同时检测该敷料抗菌性能及吸水性能。3 SD大鼠66只,随机分为1个N组(正常对照组),5个实验组为A组(磺胺嘧啶银)、B组(生理盐水)、C组(壳聚糖敷料)、D组(胶原蛋白壳聚糖敷料)、E组(胶原蛋白壳聚糖纳米银敷料),实验组每只大鼠背部制作四个深II°烫伤创面,时相点分别为烫伤后第1、3、7、10、14、21d,每个时相点10只。观察各组创面愈合率;HE染色观察其病理改变;ELISA法检测各组创面组织中生长因子(VEGF、EGFL-7、TGF-β1、b FGF)及炎症因子(TNF-α、IL-1β)的水平。结果:1生长曲线显示1600 mg/L胶原蛋白-壳聚糖混合液组、1600 mg/L小分子胶原蛋白溶液组、500 mg/L小分子壳聚糖溶液组、4800 mg/L大分子胶原蛋白溶液组、1000 mg/L大分子壳聚糖溶液组细胞增殖明显增强。而纳米银溶液组只有浓度为2.5mg/L时对细胞增殖无明显抑制作用,与空白对照组比较无统计学意义,表明2.5mg/L的纳米银溶液为对细胞无负作用的最高浓度。ELISA结果显示上清液中胶原蛋白-壳聚糖混合液组生长因子(VEGF、EGF、PDGF、TGF-β1、b FGF)水平显著高于大、小分子胶原蛋白溶液组、大、小分子壳聚糖溶液组以及空白对照组(P<0.05);而大、小分子胶原蛋白溶液组和大、小分子壳聚糖溶液组也显著高于空白对照组(P<0.05);而纳米银溶液组(2.5mg/L)与空白对照组比较无明显差异(P>0.05)。胶原蛋白-壳聚糖混合液组炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8)水平与大、小分子胶原蛋白溶液组和大、小分子壳聚糖溶液组及空白对照组比较呈显著性下降(P<0.05);大、小分子分子壳聚糖溶液组炎症因子水平也显著低于空白对照组(P<0.05);而大、小胶原蛋白溶液组和纳米银溶液组(2.5mg/L)与空白对照组比较差异无统计学意义。2胶原蛋白壳聚糖纳米银敷料表面可检测到均匀的银纳米粒子,敷料纳米银释放率在1%左右,局部纳米银浓度远低于2.5mg/L;胶原蛋白壳聚糖敷料对绿脓杆菌、大肠杆菌、金葡菌的24h抑菌率分别为88.0%、92.0%、90.7%,具有一定的抑菌作用,而胶原蛋白壳聚糖纳米银敷料对这三种菌株的抑菌率均达到了99.9%,且吸水性能较强。3与A组和B组比较,C、D和E组敷料均能明显促进深II度烫伤创面的愈合(P<0.05),且D和E组敷料显著优于C组敷料(P<0.05),HE染色也显示其组织内炎症细胞浸润,纤维组织增生,新生血管明显增多,可见分化成熟的再生上皮细胞。与N组比较,各实验组创面组织中生长因子(EGFL7、b FGF、TGF-β1、VEGF)水平在伤后均呈不同程度下降(P<0.05),其中VEGF在伤后第1d虽有所下降,但D和E组创面VEGF水平明显高于其它实验组(P<0.05);与N组比较,各实验组EGFL7水平在伤后第14d后均呈显著性上升(P<0.05);E组创面b FGF水平在伤后第10d显著高于其它实验组(P<0.05);与N组比较,各实验组TGF-β1水平在伤后第10d均呈显著性升高(P<0.05),尤其D和E组也显著高于其它实验组(P<0.05)。与N组比较,各实验组创面组织中炎症因子(TNF-α、IL-1β)水平在伤后均呈不同升高,其中A组和B组炎症因子水平与N组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论:用于制备胶原蛋白壳聚糖敷料的混合液与其单一成分比较更能有效促进血管内皮细胞增殖,而胶原蛋白壳聚糖纳米银敷料则具有一定抗菌性能,能促进深II度烫伤创面愈合,并调控创面组织生长因子生成和炎症反应。