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目的:通过观察针刺联合亚低温疗法对大脑中动脉缺血(Middle cerebralartery occlusion,MCAO)大鼠的神经功能缺损评分、脑梗死面积比值、脑组织中miRNA-29c及其靶基因Map4k4、Map3k14、Fem1b表达,探讨针刺联合亚低温对脑缺血再灌注引起脑组织损伤的保护机制。方法:用改良后的Zea Longa线拴法制备MCAO大鼠模型,60只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组,每组10只。针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组分别做针刺、亚低温、针刺结合亚低温治疗,72小时后,观察各组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积比值、缺血侧海马组织miRNA-29c及其靶基因Map4k4、Map3k14、Fem1b的表达。结果:1、神经功能评分:治疗前,各造模组(模型组、针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组)与空白组、假手术组相比,造模组神经功能评分均明显增加,差异具有显著统计学意义(P<0.01),各造模组间相比,差异无统计学意义(P>0.05),说明造模成功。治疗72h之后,与模型组相比,各治疗组(针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组)评分均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。2、脑梗死面积比值:与空白组、假手术组比较,各造模组梗死面积比值均明显增加,差异有显著统计学意义(P<0.01),说明均造模成功;经过72h治疗之后,与模型组比较,各治疗组梗死面积比值均减少,差异有统计学意义(P<0.01);与针刺组、亚低温组比较,针刺联合亚低温组梗死面积比值明显减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。3、脑组织中miRNA-29c表达:与模型组相比,针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组均能降低miRNA-29c在脑组织中的表达,差异有显著统计学意义(P<0.01);与针刺组、亚低温组相比,针刺联合亚低温组下调miRNA-29c表达趋势明显,但差异无统计学意义(P>0.05),可能与样本量过少有关。4、缺血侧海马组织Map4k4、Map3k14、Fem1b表达:与模型组相比,针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组均能下调Map4k4在脑组织中的表达,差异有显著统计学意义(P<0.01);与亚低温组相比,针刺联合亚低温组能显著下调Map4k4的表达,差异有显著统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组均能下调Map3k14在脑组织中的表达,差异有显著统计学意义(P<0.01);与亚低温组、针刺组相比;针刺联合亚低温组下调Map4k4的表达趋势明显,但差异无统计学意义(P>0.05),可能与样本量过少有关。与模型组相比,针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组均能上调Fem1b在脑组织中的表达,差异有显著统计学意义(P<0.01);与针刺组、亚低温组相比,针刺联合亚低温组上调Fem1b表达趋势明显,但差异无统计学意义(P>0.05),可能与样本量过少有关。结论:1、针刺组、亚低温组、针刺联合亚低温组,均可降低神经功能缺损评分,减少脑梗死面积比,起到保护脑组织作用。2、各治疗组对脑组织的保护作用,可能是通过降低MAPK通路上miRNA-29c及其靶基因Map4k4、Map3k14的表达,上调miRNA-29c靶基因Fem1b的表达来实现的。3、在减少脑梗死面积比值,上调Fem1b的表达上,针刺联合亚低温组明显优于针刺组或亚低温组,可能是因为针刺疗法与亚低温疗法起到了协同作用。