胰高血糖素异常积聚的AFM研究

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因为蛋白和多肽的异常积聚和纤维化问题与多种疾病的起因密切相关,并且蛋白纤维在纳米材料方面有广阔的应用前景,所以近些年来该问题引起了物理、化学、生物学界的广泛关注。胰高血糖素是参与调节血糖水平的重要激素类蛋白,其结构较为简单而且在多种条件下具有很强的聚集形成纤维的倾向,是研究蛋白和多肽聚集与纤维化的较为理想的模型分子。本论文中,我们主要做了以下几方面工作:(1)、利用原子力显微镜观察温度对胰高血糖素纤维化的影响。结果发现不同温度下胰高血糖素纤维化差异较大:在较低温度下(20℃)主要生成粗短的具有螺旋形结构的纤维;在较高温度下(50℃)以细长的非螺旋形纤维为主;而在中间温度下(37℃)这两种类型的纤维数量差不多。(2)、我们从以下几个方面探索了粗短螺旋形和细长非螺旋形这两种类型的纤维的差异性:第一我们分别利用直观可见的原子力显微镜扫描图片和具有理想统计效果的动态光散射技术统计了两种纤维的生长速度,两种测试方法结果都显示:非螺旋形纤维的生长速度时是旋形纤维生长速度的10倍左右;第二我们探索了这两种类型纤维的稳定性,通过变换生长温度发现,这两种类型的纤维一旦生成,在一定条件范围内能够比较稳定的存在;第三我们初步尝试对这两种类型纤维在固液界面上的生长过程进行了实时观测,结果显示,这两种类型的纤维是独立由短到长逐渐生长的。(3)、利用基于原子力显微镜的force-volume方法探索了单条纤维的纳米力学性质。选取螺旋形纤维峰点、螺旋形纤维谷点和非螺旋形纤维这三个典型位置测量分析压缩弹性,结果显示,螺旋形纤维峰点最软,其弹性模量约为720 MPa,螺旋形纤维的谷点最硬,其弹性模量约为1.26 GPa,而非螺旋形纤维硬度介于两者之间,其弹性模量约为890 MPa。我们分析,该差异性与其结构有直接关系。
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