论文部分内容阅读
目的:本实验旨在通过观察大鼠血脂、血清ALT、AST、空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)及肝脏的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总谷胱甘肽(T-GSH)水平,肝组织病理变化情况,NF-κB、TNF-α的mRNA和蛋白质的表达情况,进一步探讨祛湿化痰逐瘀法抗非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的分子机制,为临床治疗非酒精性脂肪肝提供理论基础和多种治疗手段。方法:将60只Wistar大鼠随机分成正常组和模型组。除正常组,其余各组予高脂乳剂灌胃复制大鼠NAFLD模型5周后,将模型组随机分为模型组、胆碱组(多烯磷脂酰胆碱干预组)、中药低剂量组(加味茵芍散低剂量干预组)、中药中剂量组(加味茵芍散中剂量干预组)、中药高剂量组(加味茵芍散高剂量干预组)。第6周起胆碱组和中药各组大鼠分别给予多烯磷脂酰胆碱及加味茵芍散中药每天灌胃干预。12w末处死,称量各组大鼠体重、肝组织湿重;检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA、ALT、AST、FPG、FINS、肝脏MDA、SOD、T-GSH;计算肝指数及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),HE染色及油红O染色观察各组大鼠肝组织病理学改变。免疫组化和RT-PCR分别检测各组大鼠肝组织NF-κB、TNF-α蛋白质和mRNA的表达水平。结果:1.与模型组比较,中药各组大鼠血清TG、TC、LDL-C、FFA、AST、ALT、FPG、FINS、HOMA-IR水平,肝指数及肝脏MDA值均显著降低(P<0.05),血清HDL-C及肝脏SOD、T-GSH值结果显著升高(P<0.05)。2.HE染色可见:模型组大鼠肝组织细胞有明显的脂肪变性,视野中显示大量的脂滴空泡,胞质疏松明显且呈渔网状,可见炎细胞浸润存在于汇管区;中药中剂量组及中药高剂量组肝组织细胞的结构破坏程度较轻,部分细胞脂滴形成,与模型组、胆碱组比较程度较轻;油红O染色可见:模型组大鼠被染成深蓝色的肝细胞核,细胞内呈大量弥漫性的红色脂滴,可见肝细胞脂滴融合成大脂滴,中药高剂量组大鼠较正常组大鼠的肝细胞脂滴含量差异性最小。3.RT-PCR结果示:给予加味茵芍散的大鼠肝脏组织内NF-κB、TNF-α在mRNA水平上均低于模型组大鼠和胆碱组大鼠。免疫组化结果见:模型组NF-κB、TNF-α阳性表达高于给药组,胆碱组NF-κB、TNF-α阳性表达高于中药高剂量组。结论:基于祛湿化痰逐瘀立法的加味茵芍散可缓解NAFLD大鼠的肝脏脂肪变性,对NAFLD具有较好的防治功效。它可能的作用机制是:1.基于祛湿化痰逐瘀立法的加味茵芍散能改善脂质代谢紊乱,降低血脂和减少脂质在肝脏中的过度沉积,减轻肝细胞变性、坏死,改善肝功能。2.基于祛湿化痰逐瘀立法的加味茵芍散可通过降低血糖和胰岛素水平,改善胰岛素抵抗(insulinresistance,IR),逆转非酒精性脂肪肝的程度。3.基于祛湿化痰逐瘀立法的加味茵芍散具有改善肝脏抗氧化应激状态和脂质过氧化作用,减轻脂肪肝的进展。4.加味茵芍散抗NAFLD的作用机制,可能与抑制或下调NF-κB、TNF-α的mRNA和蛋白质表达,从而阻断IKKβ/NF-κB细胞通路的激活有关。