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目的:1.探讨吉西他滨(GEM)对自身免疫性肝炎(AIH)小鼠CD4+T细胞Th1、Th2、Th17、Treg(CD4+CD25+调节性T细胞)和髓源抑制性细胞(MDSC)的影响及对细胞周期和凋亡的影响。2.探讨GEM作用后T、B细胞及巨噬细胞功能的变化情况。方法:4-6周龄雄性C57BL/6小鼠40只,随机分出8只为正常对照组(Control),其余32只于第1、8天两次腹腔注射同种属肝抗原S-100与弗氏完全佐剂混悬液1ml/只,制成AIH小鼠模型。模型鼠随机分为生理盐水(NS)、吉西他滨(GEM)、激素(Hormone)处理组及GEM联合Hormone的联合(Combination)处理组。于15天开始干预处理,GEM和Hormone用量分别为每只100mg/kg(GEM)和1mg/kg(地塞米松),Hormone每日注射一次,NS和GEM每周注射一次,均为腹腔注射0.2ml/只。连续用药3周后,流式检测各组小鼠脾细胞中Th1(IFN-γ+CD4+)/CD4+T细胞、Th2(IL-4+CD4+)/CD4+T细胞、Th17(IL-17A+CD4+)/CD4+T细胞、Treg(CD4+CD25+CD127low/-)/CD4+T的比例及MDSC占脾细胞比例,另检测各组脾细胞的细胞周期和凋亡情况;q RT-PCR检测脾细胞中T-bet、Gata3、RORγt、Foxp3 m RNA的表达;MTT法检测T细胞和B细胞的增殖能力,Transwell实验检测各组小鼠腹腔巨噬细胞的迁移能力。结果:1.各组脾脏大小结果:与Control组相比,各组小鼠脾脏均明显肿胀;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组肿胀程度降低;与GEM组相比,Hormone及Combination组脾脏肿胀程度降低;Hormone与Combination组无差异。2.Th1(IFN-γ+CD4+)/CD4+T值:与Control组相比,除Combination组无差异外,其余各组均升高;与NS组相比,GEM组无差异,Hormone和Combination组均降低;与GEM组相比,Hormone组无差异,Combination组降低;与Hormone组相比,Combination组降低。Th2(IL-4+CD4+)/CD4+T值:与Control组相比,各组均升高;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均降低;与GEM组相比,Hormone及Combination组均降低;Hormone与Combination组无差异。Th17(IL-17A+CD4+)/CD4+T值与Th2(IL-4+CD4+)/CD4+T检测结果完全一致。3.Treg(CD4+CD25+CD127low/-)/CD4+T值:与Control组相比,除NS组降低外,其余各组均无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均升高;而GEM,Hormone及Combination组间均无差异。4.MDSC占脾淋巴细胞百分比:与Control组相比,各组均升高;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均升高;与GEM组相比,Hormone组无差异,Combination组升高;Hormone与Combination组无差异。5.细胞凋亡:与Control组相比,除NS组升高外,其余各组均无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均下降;而GEM,Hormone及Combination组间均无差异。6.细胞周期:与Control组相比,各组在G0/G1期均下降,S期均升高,G2/M期在各组间均无差异;NS、GEM、Hormone及Combination组相互之间均无差异。7.T、B细胞增殖功能:与Control组相比,各组均降低;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均升高;与GEM组相比,Hormone及Combination组升高;而Hormone及Combination组间无差异。8.巨噬细胞迁移能力:与Control组相比,各组均降低;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均升高;与GEM组相比,Hormone及Combination组升高;而Hormone及Combination组间无差异。9.T-bet表达:与Control组相比,除NS组升高外,其余各组均无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均下降;而GEM,Hormone及Combination组间均无差异。Gata3的表达结果与T-bet的完全一致。RORγt的表达:与Control组相比,NS组和GEM组升高,Hormone组和Combination组无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均下降;与GEM组相比,Hormone组无差异,Combination组降低。Foxp3的表达:与Control组相比,NS组和GEM组降低,Hormone组和Combination组无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均升高;与GEM组相比,Hormone组无差异,Combination组升高;与Hormone组相比,Combination组升高。10.Th1/Th2比值:与Control组相比,除NS组升高外,其余各组均无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均下降;而GEM,Hormone及Combination组间均无差异。Th17/Treg比值:与Control组相比,各组均升高;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均下降;与GEM组相比,Hormone组和Combination组均下降;而Hormone组和Combination组无差异。T-bet/Gata3比值在各组间无差异。RORγt/Foxp3比值:Control组相比,NS组和GEM升高,Hormone组和Combination组无差异;与NS组相比,GEM、Hormone及Combination组均下降;与GEM组相比,Hormone组和Combination组均下降;而Hormone组和Combination组无差异。结论:GEM能降低AIH小鼠Th1、Th2、Th17比例,升高Treg和MDSC比列,Th1/Th2比值向Th2方向移动,Th17/Treg比值向Treg方向移动。GEM作用后对细胞周期无影响,可以减少细胞凋亡。GEM可以增强T、B细胞及巨噬细胞的功能。但是GEM作用效果不如激素及联合处理。GEM对AIH小鼠免疫细胞具有类似激素的调控作用。