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背景脓毒症是指由感染因素引起的全身性炎症反应综合征,其病情凶险,病死率高。子宫内膜再生细胞(Endometrial regenerative cells,ERCs)来自于月经血,其表型类似间充质干细胞(Mesenchymal stromal cells,MSCs),但具有诸多优势。人类ERCs治疗已于多种动物疾病模型中被证实有效,并得到临床应用。基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1),亦称为CXCL12,其特异性结合受体为CXCR4,该受体表达于ERCs表面,其特异性阻滞剂为AMD3100。SDF-1/CXCR4通路介导细胞粘附、趋化和增殖,并在不同物种间高度保守。值得注意的是,SDF-1可影响ERCs表面CXCR4的表达,并且ERCs自身可分泌大量的SDF-1。我们推测高表达CXCR4的ERCs可在SDF-1趋化作用下到达损伤位点,并可分泌SDF-1募集更多的ERCs来调节免疫失衡和减轻组织损伤。综上,本研究旨在探讨SDF-1在介导ERCs抑制小鼠脓毒症中的作用及相应机理。目的1.明确SDF-1对ERCs表面CXCR4表达水平的影响;2.明确SDF-1预处理的ERCs对小鼠组织中CXCR4和SDF-1表达水平的影响;3.探讨SDF-1在介导ERCs抑制小鼠脓毒症中的作用。方法1.体外实验,将ERCs与两种浓度的SDF-1溶液(0 ng/ml,50 ng/ml)进行72小时的共培养,通过流式细胞术分析CXCR4阳性ERCs所占百分比。2.体内实验,检测ERCs治疗的脓毒症小鼠肝脏和肺脏中CXCR4和SDF-1的表达水平。3.通过C57B/L6小鼠腹腔注射10 mg/kg脂多糖溶液建立脓毒症模型。分组为:(1)正常对照组,(2)未治疗组,(3)未预处理的ERCs治疗组,(4)AMD3100预处理的ERCs治疗组以及(5)SDF-1预处理的ERCs治疗组。记录小鼠的脓毒症相关症状、直肠温度及生存情况。24小时后行小鼠安乐死,并收集血清和肝脏肺脏。检测凋亡及增殖相关细胞因子(Bax、Bcl-2、PCNA),炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10、NF-κB)和氧化应激相关因子(i NOS、MDA、Nrf2、SOD、HO-1)的表达水平。结果1.体外实验显示,与50 ng/ml SDF-1共培养的ERCs细胞表面CXCR4表达水平显著高于与0 ng/ml SDF-1共培养的ERCs表面CXCR4表达水平。2.体内实验显示,SDF-1预处理ERCs治疗组肝脏及肺脏组织中CXCR4及SDF-1 mRNA表达水平高于未预处理ERCs治疗组,并且未预处理ERCs治疗组高于AMD3100预处理ERCs治疗组。3.与未预处理ERCs治疗组相比,SDF-1预处理ERCs治疗组小鼠脓毒症相关症状显著改善,肝脏及肺脏病理损伤显著减轻。细胞凋亡方面,Bax mRNA水平显著下降,Bcl-2 mRNA水平、Bcl-2/Bax mRNA ratio和PCNA蛋白水平显著升高。炎症反应方面,TNF-α、IL-1β水平显著降低,IL-4、IL-10水平显著升高。氧化应激方面,i NOS mRNA水平以及MDA浓度显著降低,SOD、HO-1和Nrf2的mRNA水平显著升高。AMD3100预处理ERCs治疗组上述表现劣于未预处理ERCs治疗组。结论1.SDF-1预处理可使ERCs表面CXCR4表达水平显著升高,并且这是SDF-1预处理ERCs治疗效果显著优于未预处理ERCs治疗效果的关键;2.SDF-1预处理ERCs可使肝和肺组织中CXCR4及SDF-1 mRNA水平显著升高;3.SDF-1预处理ERCs进一步改善小鼠脓毒症症状;4.SDF-1预处理ERCs进一步缓解肝脏和肺脏病理损伤;5.SDF-1预处理ERCs进一步增强肝脏细胞的抗细胞凋亡能力和增殖能力;6.SDF-1预处理ERCs进一步增强脓毒症过程中的免疫调节;7.SDF-1预处理ERCs进一步增强脓毒症过程中的抗氧化应激作用。