魟鱼骨素对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响

来源 :辽宁医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:radcuijun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨魟鱼骨素(RCE)对人乳腺癌细胞系MCF-7的增殖抑制作用及促进此癌细胞株凋亡的作用,观察细胞在不同药物浓度及作用时间下的增殖曲线,摸索出最佳的药物浓度及处理时间,观察其与细胞周期中的某些周期蛋白的关系,经过进一步筛选探索出作为细胞周期的正负调控因子细胞周期蛋白D1和p21,观察其异常表达,研究其可能存在的内在分子生物学机制。方法MCF-7培养于含10%的新鲜胎牛血清及100U/ml青-链霉素的RPMI-1640培养液中,置37℃下5%CO2培养箱。每2~3d换液1次,3~5d传一代,使用胰酶消化传代。分别加入终浓度为2.5、5、10、20、40μmol/L的RCE处理人乳腺癌细胞MCF-7不同时间即24h、48h及72h,使用96孔板培养,每组设五个复孔,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)进行染色,酶联免疫标记仪检测各组MCF-7细胞吸光度,绘制增殖曲线,摸索适合后期实验的最佳作用浓度及时间;流式细胞仪(FCM)检测采用IP染料单染所得的细胞周期DNA分布图,观察RCE作用前后对细胞周期的影响,采用双染细胞检测试剂(AnnexinV-FITC/IP)进行双染所得正常细胞、死亡细胞、发生程序性死亡细胞的分布图,观察RCE药物作用前后发生程序性死亡的细胞所占的比例,从而判定其促凋亡作用; Western blot(WB)检测RCE药物作用前后作为细胞周期的正负调控因子cyclin D1及p21表达的异常变化。结果MTT检测结果显示只有在一定浓度及时间范围内RCE对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用呈浓度依赖性和时间依赖性(p<0.05)。RCE具有最大抑制浓度10μmol/L和最佳作用时间48h。FCM检测结果发现随着10μmol/L浓度的RCE作用时间延长,流式细胞仪检测发现随着RCE作用时间的延长S期细胞百分比明显增加(p<0.05)而G2/M期细胞比例明显减少(p<0.05),而且凋亡细胞占所有检测细胞的比例随RCE作用时间的延长表现为明显升高(p<0.05);WB检测结果表明随着10μmol/L浓度的RCE作用时间延长,人乳腺癌细胞MCF-7中的cyclin D1表达量逐渐降低,p21蛋白表达量逐渐增强(p<0.05)。结论1、RCE具有抑制人乳腺癌细胞MCF-7分裂增殖的能力,这种抑制此癌细胞株增殖的能力存在最大抑制浓度c=10μmol/L和最佳作用时间t=48h;2、RCE具有促进人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的作用;3、RCE能阻滞细胞从DNA合成期向DNA合成后期转化,将细胞阻滞在DNA合成期。4、分析其分子生物学机制与cyclin D1低表达和p21过表达有一定关系。
其他文献
随着国家对节能环保要求的进一步提高,越来越多的火电厂已经将引风机及凝结水泵等大功率重要辅机设备更换为变频驱动电机,为了保障机组的安全稳定运行,要求辅机变频器具有更
在高三生物的教学过程中,复习是一个不可或缺的重要环节。复习的形式和方法各种各样,但是在实际教学中,教师为了使学生在考试中获得较高的分数,在教学上赶进度,增密度,形成了“以练
用“翘辫子”比喻“死”,据说有三种不同的源头。 一、源自清朝。那时全国上下,男人都留辫子。人活着,辫子自然往下垂;死后,要把辫子编结起来盘在头顶上,辫子末端竖起翘立。
无石棉垫片作为一种密封件以其污染小,对人体危害小等优点,慢慢取代了石棉密封垫片的位置,应用于生产和生活的各个方面。但是,相对于石棉垫片来说,无石棉垫片在某些密封性能
背景与目的:对颈淋巴结阴性的鼻咽癌患者(N0期鼻咽癌)颈部预防照射的治疗范围目前存在很大争议。本研究通过分析和比较N0期鼻咽癌上颈部预防照射和全颈部预防照射的颈部复发率和
作为新型的现代化实验教学手段,显微互动实验室的开放运行有效提高了显微互动实验室的使用效益。同时为推进素质教育,加强高素质创新人才的培养创造了条件。而规范化、制度化
毛泽东思想概论第五章是》人民民主专政的理论",这一章是对以毛泽东为代表的中国共产党人从探索建立什么样的国家到建立中华人民共和国,以及规定各阶级在新中国的地位的概括和
水利工程管理范围广,管理环境复杂,上报程序繁锁,江苏省管河湖库巡查管理信息系统为水利监管部门提供及时、高效、准确的数据信息,指导水利监管模式趋向信息化和科学化。通过