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微乳电动毛细管色谱(MEEKC)是近年来在胶束电动毛细管色谱(MEKC)基础上发展起来的一种电泳新技术,可以同时分离水溶性的、脂溶性的、带电的或不带电的物质,所分离物质的极性范围比MEKC更宽,分析窗口更宽,分离效率也更高。本实验将MEEKC技术应用于中药指纹图谱的分析,建立了中药大黄的MEEKC指纹图谱,并与其HPLC指纹图谱分析结果进行比较,聚类结果基本一致,表明MEEKC在中药指纹图谱的研究上是又一有利的手段。首先,本实验研究了微乳毛细管电动色谱体系中,表面活性剂、助表面活性剂、微乳液的内相、有机改性剂等微乳组成对分离窗口的影响。以甲醇为电渗流标记物测定电渗流时间,以强疏水性化合物菲为标记物测定微乳液滴(假固定相)的迁移时间,分析MEEKC分离窗口的变化。研究表明,微乳组成中阴离子表面活性剂SDS与有机添加剂甲醇、乙腈使分离窗口明显增大,助表面活性剂正丁醇使分离窗口变小,油的影响不大。在后面指纹图谱的建立工作中可以根据需要调节分离窗口,以达到良好的分离效果。其次,采用MEEKC方法建立了不同来源大黄样品的指纹图谱,为其质量控制提供依据。使用未涂层石英毛细管柱(75μm×65cm,有效长度55cm),采用的缓冲液为SDS-正丁醇-正辛烷-10mmol/L硼砂溶液(w/w为3.3%∶6.6%∶0.8%∶89.3%)并通过添加10%的乙腈组成的O/W型微乳体系,分离电压18 kV,检测波长280 nm。结果通过聚类分析和相似度分析处理,14个大黄样品被初步聚为三类:唐古特大黄样品,掌叶大黄一般品和掌叶大黄次品。本方法简便、可靠,可用于大黄质量评价的有效手段,使MEEKC在中药指纹图谱研究中开辟了新的应用途径。最后,采用HPLC方法建立了上述大黄样品的指纹图谱。方法采用Nucleodur C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相以甲醇∶0 .5%磷酸水溶液(1∶9,V/V)作为A相,乙腈作为B相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长280 nm。通过聚类分析和相似度分析处理,14个不同来源的大黄样品也被初步聚为三大类:唐古特大黄样品,掌叶大黄一般品和掌叶大黄次品,与MEEKC方法下的大黄样品分类结果基本一致,从而进一步验证了MEEKC应用在中药指纹图谱研究上的可行性。