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促生长激素释放激素(Growth Hormone Releasing Hormone,GHRH)是一种蛋白类激素,由下丘脑合成并分泌。它能特异的诱导垂体生长激素(Growth Hromone,GH)的合成与分泌,对脊椎动物的生长、发育及代谢调控起着极其重要的作用。本研究以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,用特异性引物扩增GHRH外显子3,以外显子3为模板,用引物延伸悬挂PCR法扩增GHRH成熟肽序列,纯化后,连接到PMD18-T载体,转化到大肠杆菌,筛选阳性克隆,测序,同源性比较。结果表明:克隆的广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列全长为132bp,其中外显子3基因序列长105bp。广西巴马小型猪GHRH外显子3基因序列与GenBank(NCBI)中报到的猪的GHRH外显子3相比:同源性为97.14%;在第84位、98位、100位发现三处碱基突变,均为转换,点突变均为无义突变。说明广西巴马小型猪的矮小体型与GHRH成熟肽分子结构之间没有直接的关系。为探讨注射GHRH真核表达质粒对动物生产性能的影响,本研究选择平均体重为14.05±5.48g的小鼠42只,按性别相同,体重相近,两两配对,分为空质粒组和PEGFP-GHRH组。试验开始,在空质粒组小鼠右腿胫骨部肌肉按0.5μg质粒/g体重注射PEGFP-N1质粒,同时PEGFP-GHRH组小鼠在相同部位按0.5μg质粒/g注射PEGFP-GHRH质粒。35天试验结果表明:外源的GHRH在肌肉中获得了表达。GHRH基因至少可以在小鼠体内滞留15天。注射PEGFP-GHRH质粒对小鼠的生长有一定的改善作用,从注射后第10天至25天,PEGFP-GHRH组体重显著高于空质粒组(P<0.05)。0~25天,PEGFP-GHRH组小鼠日增重比空质粒组提高12.3%(P<0.05)。