壬基酚的生物降解研究

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壬基酚(NonylPhenol,NP)做为一种重要的环境激素,其对环境及人体的危害已经引起人们的注意。一些研究者已开始测定环境以及生物体中NP的含量,并开始了NP毒性的研究,但关于环境中NP的消除,尤其是生物降解这一去除NP的有效方式的研究却较少。本课题实验就是对壬基酚的生物降解进行初步研究。通过在壬基酚聚氧乙烯醚和NP含量比较大的水环境中取样,回到实验室培养驯化,分离出了具有耐酚性并具有一定降解NP性能的菌种。采用革兰氏染色法确定菌种的革兰氏染色性质,然后对降解效果最好的菌株B-01进行16S rDNA序列分析,鉴定出得到的菌株是恶臭假单胞菌(pseudomonas putida)。在分离纯化出菌种以后,做了菌种对NP的降解效果的实验,以及菌种的生长曲线。根据菌种的生长曲线,在对数生长期进行NP降解条件优化的实验。本实验借助于正交试验,主要考虑了温度、pH值、时间、浓度对菌种降解NP的影响,通过计算在不同条件下的降解率,寻找降解NP的最佳条件。由实验结果可知,对于肉汤培养基培养出来的菌种B-01,在30℃、pH值为7.0,降解时间为26h,培养基中NP浓度为26.91860ng/μL(26.91860mg/L)时降解效果最好,降解率可达68.32%。对于尿素培养基培养出来的菌种B-03,降解的最优条件:温度20℃,pH值为7.0,培养时间为26h,培养基中NP浓度为5.15987ng/μL(5.15987mg/L)时降解效果最好,降解率可达55.28%。通过GC-MS检测,在最佳降解条件下,恶臭假单胞菌降解NP后的产物为辛基酚和戊基酚,由此推断出生物降解NP的机理可能为烷基链的断裂先于苯环的断裂,NP先断掉一个末端碳,成为辛基酚,然后再去掉其它碳,变成戊基酚。最后进行了恶臭假单胞菌的初步应用研究。考察了光照对于恶臭假单胞菌降解NP的影响,结果发现当存在光照时,NP的降解率较高。在菌株对于模拟废水的处理效果的研究中,发现菌种在接近实际污水水质的条件下,对NP的降解效果良好,而且对COD具有较好的去除率,可达60%以上,水质明显改观。
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