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根据本实验室在GenBank中注册的四川白鹅白细胞介素2（GoIL-2）基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,对GoIL-2基因进行PCR扩增、序列测定及生物信息学分析后,开展GoIL-2基因原核表达载体构建和表达产物纯化、表达产物生物学活性检测、表达产物对小鹅瘟弱毒疫苗和VP3基因工程重组亚单位疫苗的佐剂效应研究,获如下结果:1 GoIL-2原核表达、产物纯化和生物学活性PCR扩增GoIL-2成熟蛋白基因并克隆到pMD18-T载体,测序鉴定后将其连接到原核表达载体pET32a+,转化宿主菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达。结果,表达出大小约34KD重组GoIL-2蛋白,以可溶性形式存在,占菌体总蛋白的42.5%。重组蛋白经镍金属螯合介质填料（Ni+-MIAC）后得到纯化,复性后用MTT法检测表达产物的相对生物学活性单位为110672U/mg。2重组GoIL-2对小鹅瘟VP3基因工程重组亚单位疫苗、GPV弱毒疫苗免疫青年鹅佐剂效应研究重组GoIL-2以500U/只、1000U/只、2000U/只分别与小鹅瘟VP3基因16抗原决定簇重组亚单位工程疫苗（Ag16v）、小鹅瘟VP3基因10抗原决定簇重组亚单位工程疫苗（Ag10v）和GPV弱毒疫苗同时免疫青年鹅,分为12组:500U+Ag16v、1000U+Ag16v、2000U+Ag16v、500U+Ag10v、1000U+Ag10v、2000U+Ag10v、1000U+GPV,同时设Ag16v对照组、Ag10v对照组、GPV弱毒对照组、IL-2对照组、PBS对照组。（1）细胞免疫:免疫后第3d、7d、14d、21d、28d、35d、49d采血,用MTT法检测青年鹅细胞免疫水平。结果:试验组鹅外周血中T淋巴细胞转化率于7-49d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于PBS对照组。①2000U+Ag16v组,14-49d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag16v对照组和500U+Ag16v组,于21-28d显著（P＜0.05）高于1000U+Ag16v组。500U+Ag16v组与Ag16v对照组差异不显著（P＞0.05）。②2000U+Ag10v组,14-49d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag10v对照组和500U+Ag10v组,于21-28d显著（P＜0.05）高于1000U+Ag10v组。500U+Ag10v组与Ag10v对照组差异不显著（P＞0.05）。③1000U+GPV组,14-28d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于GPV对照组。结果表明GoIL-2能够增强小鹅瘟VP3基因工程重组亚单位疫苗和GPV弱毒疫苗诱导的细胞免疫应答,且具有一定的剂量依赖性。（2）体液免疫:免疫后第3d、7d、14d、21d、28d、35d、49d、63d、77d、91d、105d、119d、133d、147d、161d、175d采血,用ELISA法和中和抗体试验检测青年鹅体液免疫水平。结果:①ELISA抗体:试验组于7-175d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于PBS对照组、IL-2对照组。2000U+Ag16v组于14-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag16v对照组和500U+Ag16v组,于21-28d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于1000U+Ag16v组。500U+Ag16v组与Ag16v对照组差异不显著（P＞0.05）。2000U+Ag10v组于14-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag10v对照组、500U+Ag10v组,于21d、49d、77d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于1000U+Ag10v组。500U+Ag10v组与Ag10v对照组差异不显著（P＞0.05）。1000U+GPV组,于21d时达到峰值,于14-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于GPV弱毒疫苗对照组。②中和抗体:试验组、对照组（除PBS对照组、IL-2对照组）都产生了特异性GPV抗体。2000U+Ag16v组21-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于500U+Ag16v组和Ag16v对照组,21-35d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于1000U+Ag16v组。500U+Ag16v组与Ag16v对照组差异不显著（P＞0.05）。2000U+Ag10v组于14-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag10v对照组和500U+Ag10v组,于21d、28d极显著（P＜0.01）高于1000U+Ag10v组。500U+Ag10v免疫组中和抗体效价与Ag10v对照组差异不显著（P＞0.05）。1000U+GPV组21-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于GPV弱毒疫苗对照组。体液免疫试验表明重组GoIL-2能够增强小鹅瘟VP3基因工程重组亚单位疫苗和GPV弱毒疫苗诱导的体液免疫应答,且具有一定的剂量依赖性。3重组GoIL-2对小鹅瘟VP3基因工程重组亚单位疫苗、GPV弱毒疫苗免疫开产前种鹅佐剂效应研究重组GoIL-2以6000U分别与GPV弱毒疫苗、Ag16v和Ag10v免疫种鹅,同时设Ag16v对照组、Ag10v对照组、GPV弱毒对照组、IL-2对照组、PBS对照组,免疫后第3d、7d、14d、21d、28d、35d、49d、63d、77d、91d、105d、119d、133d、147d、161d、175d各组随机采集种鹅血、收集种蛋进行血清和卵黄抗体检测,同时孵化种蛋以100个LD50GPV-CHv强毒株对后代雏鹅进行攻毒保护试验。结果:（1）血清ELISA抗体:试验组于7-175d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于PBS对照组、IL-2对照组。6000U+Ag16v、6000U+Ag10v和6000U+GPV免疫组,7-147d分别极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag16v、Ag10v和GPV对照组。（2）血清中和抗体:试验组、对照组（除PBS对照组、IL-2对照组）都产生了特异性GPV抗体。6000U+Ag16v、6000U+GPV免疫组,21-147d分别极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag16v、GPV对照组。6000U+Ag10v,14-147d极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag10v对照组。（3）卵黄ELISA抗体:6000U+Ag16v、6000U+Ag10v和6000U+GPV免疫组,7-147d分别极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag16v、Ag10v和GPV对照组。（4）卵黄中和抗体:试验组和对照组（除PBS对照组、IL-2对照组）都产生了特异性GPV抗体。其中IL-2+Ag16v、IL-2+Ag10和IL-2+GPV免疫组抗体的中和效价于21-147d分别极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于Ag16v、Ag10v和GPV对照组。表明重组GoIL-2增强了小鹅瘟VP3基因工程重组亚单位疫苗和GPV弱毒疫苗诱导的种鹅血清和卵黄抗体水平。（5）攻毒保护率:Ag16v+IL-2、Ag10v+IL-2、GPV+IL-2于21d达到100%保护率持续至161d,175d时对后代雏鹅的保护率分别降到80%、80%、90%,对后代雏鹅的免疫保护期达140d,而Ag16v、Ag10v、GPV对照组于28d达到100%保护率分别持续至147d、147、161d,对后代雏鹅的免疫保护期分别为119d、119、133d。试验组其后代雏鹅免疫保护期较对照组长7-21d,表明重组GoIL-2能够提高小鹅瘟VP3基因工程重组亚单位疫苗和GPV弱毒疫苗免疫种鹅后对其后代雏鹅的攻毒保护率。