bCAT通过减少白色念珠菌的粘附抑制生物被膜形成的机制研究

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目的:明确bCAT是否具有抑制白色念珠菌生物被膜形成的作用,并探索该作用与粘附基因HWP1表达的关系。方法白色念珠菌标准菌株ATCC10231及临床菌株作为研究对象,XTT法检测其形成生物被膜的能力,通过CLSI-M27-A3方法确定b CAT抗浮游状态MIC值,XTT法及菌落计数检测bCAT抑制生物被膜形成作用,并计算代谢活性确定BIC50,bCAT减少白色念珠菌的粘附作用经倒置显微镜下观察及菌落计数法确定,并采用RT-PCR检测HWP1的表达,空白对照组和实验组使用独立样本t检验,并通过2-ΔΔCt法计算相对表达量。统计方法为单因素方差分析,组内比较采用Dunnett T3检验。结果:标准菌株及临床菌株均有强生物被膜形成能力。b CAT抗浮游状态的白色念珠菌MIC值为40-80μmol/L,抑制白色念珠菌生物被膜形成BIC50为80-160μmol/L;并且bCAT能减少白色念珠菌的粘附作用,空白对照组菌落计数为27822.22±2472.74 cfu,bCAT浓度为160、80、40、20、10μmol/L时的菌落个数分别为5355.55±1264.03 cfu、11377.78±2232.58 cfu、17488.89±1136.27 cfu、22377.78±3521.99 cfu、26044.44±1329.57 cfu。组间差异具有统计学差异(F=147.018,P=0.000),组内比较发现160、80、40μmol/L处理组与不含bCAT时差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR发现160μmol/L处理组HWP1相对表达量为不含bCAT的空白对照组的12.24±11.55%,差异具有统计学意义(t=58.985,P<0.05)。结论:bCAT能够有效抑制白色念珠菌形成生物被膜,其机制可与降低HWP1基因的表达从而减少白色念珠菌的粘附有关。以上研究结果为了解CGA衍生的天然抗菌多肽的先天性免疫作用增加了新的数据,并且为临床白色念珠菌耐药的问题提供了新的解决思路。
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