【摘 要】
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目的： 研究Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)在结肠炎症中的作用,探讨LPS在炎症性肠病中的治疗作用。 方法： 取正常肠上皮细胞进行体外脂多糖(lipopolysacchari
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目的： 研究Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)在结肠炎症中的作用,探讨LPS在炎症性肠病中的治疗作用。 方法： 取正常肠上皮细胞进行体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预培养。采用慢病毒转染技术,构建TLR4低表达、正常表达及高表达的肠上皮细胞亚组。正常表达组(normal组)及高表达组(high组)培养基中加入LPS诱导细胞炎症,刺激时间分别为0、2、4h。Western blot法检测TLR4的表达;收集细胞上清液,ELISA检测各亚组细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的水平。收集细胞,qPCR检测细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1βmRNA的表达水平。划痕试验观察对比2组细胞的迁移能力。通过观察给予LPS激动剂，阻断剂和生理盐水对DSS诱导的IBD小鼠体重变化，结肠长度变化，DAI评分，结肠病理组织学分析等方法，研究LPS对DSS诱导的IBD的作用。 结果： LPS干预培养细胞后,TLR4的表达量显著增加(P<0.05)。ELISA和qPCR检测高表达组与正常表达组组间细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1β的蛋白和mRNA水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。划痕试验提示TLR4高表达组的细胞迁移能力明显高于正常对照组。激动剂组小鼠的体重高于阻断剂组，结肠长度激动剂组长于阻断剂组。 结论： LPS影响TLR4炎症通路的活化,促进前炎症因子及辅助刺激分子的释放,起到调节炎症反应的作用。
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