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目的:
本研究旨在探讨微量元素镁在膀胱癌中的含量变化及可能的作用机制,探讨镁转运蛋白TRPM7在膀胱癌中的表达情况,并探讨其在膀胱癌发生发展中的作用,为进一步的研究奠定基础。
方法:
1、原子吸收分光光度计法检测膀胱癌患者尿液和血清中的微量元素含量。
收集76位膀胱癌患者和80位健康人的尿液和血清,用原子吸收分光光度计法检测尿液和血清中的微量元素镁、钙的含量。
2、实时定量PCR方法检测膀胱癌细胞系中TRPM7 mRNA的表达水平。
培养膀胱癌细胞系SV,BIU-87,T24,5637共四种细胞型,用实时定量PCR方法检测TRPM7 mRNA的表达水平。
3、免疫荧光方法检测膀胱癌细胞系中TRPM7蛋白的定位情况。
培养膀胱癌细胞系SV,BIU-87,T24,5637共四种细胞型,用免疫荧光方法检测TRPM7蛋白在细胞中的定位情况。
4、Western Blot方法检测膀胱癌组织和正常膀胱组织中TRPM7蛋白的表达水平。
收集33对膀胱癌及癌旁正常组织,用Western Blot方法检测TRPM7蛋白的表达水平。
结果:
1、正常人组血清中的钙含量高于膀胱癌病人组(P=0.002<0.05),正常人组尿液中的钙和镁含量均低于膀胱癌病人组(P值分别为0.005和0.039,均小于0.05)。
2、膀胱癌细胞BIU-87,T24,5637中的TRPM7 mRNA水平明显低于膀胱细胞SV。
3、TRPM7蛋白在膀胱癌细胞SV、BIU-87、T24中主要存在于胞质,核周和核内少见;在膀胱癌细胞5637中向核周聚集,胞质相对少见。
4、膀胱癌组织中的TRPM7蛋白水平明显低于正常组织。
结论:
1、钙镁离子的代谢失衡和膀胱癌的发生发展有一定的相关性。
2、TRPM7在膀胱癌中可能存在抑癌作用,作用机制可能与其在细胞中的位置变化有关。