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目的1、检测急性髓细胞白血病M4Eo型患者中ETV6基因重排。2、探讨ETV6基因重排在急性髓细胞白血病M4Eo型发病机制中的作用。3、初步揭示ETV6基因重排与急性髓细胞白血病M4Eo型患者预后的关系。材料与方法1、病例资料11例AML-M4Eo患者均为初治病例,男性5例,女性6例,中位年龄25(13-37)岁,临床诊断根据患者的临床表现,骨髓细胞形态学,骨髓细胞化学染色,免疫学,细胞遗传学和分子生物学检查结果并参照2001年WHO的分型和诊断标准来确定。2、骨髓细胞培养及染色体制备取患者骨髓标本,在无刺激条件下培养16-24小时后收获细胞,采用直接法和(或)短期培养法制备骨髓细胞染色体。3、传统细胞遗传学分析制备骨髓细胞染色体后进行R显带处理,核型根据《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN 1995)》识别和描述。4、Split-signal FISH分析应用分裂探针DIG525I3和Bio407P10,对11例AML-M4Eo患者染色体标本进行荧光原位杂交检测其ETV6重排情况。5、逆转录聚合酶链反应对涉及12p13和1q25易位的患者采用巢式RT-PCR检测ETV6/ARG融合基因。结果1、传统细胞遗传学分析采用骨髓细胞染色体R显带核型分析11例AML患者中,异常染色体检出率为54.5%(6/11),异常染色体中有4例为inv(16),2例为22三体(+22),传统核型分析未发现12p13和1q25畸变。2、Split-signal FISH对11例AML-M4Eo患者染色体标本进行荧光原位杂交检测其ETV6重排情况,发现在一例inv(16)的患者中存在12p13,1q25的易位,核型为46 XY,inv(16),t(1;12)(q25;p13)。3、RT—PCR对涉及12p13和1q25易位的患者采用RT-PCR可检测到ETV6/ARG融合基因产物。这是国际上第2例报道ETV6/ARG融合基因在AML-M4Eo中表达。4、伴有ETV6/ARG融合基因的患者对化疗不敏感,预后较ETV6/ARG融合基因阴性者差。结论1、ETV6基因重排是涉及12p13染色体易位较常见的目的基因,它与急性髓细胞白血病M4Eo型患者的发病有密切关系。2、ETV6基因重排与急性髓细胞白血病M4Eo型患者的临床表现有较密切关系。ETV6基因重排的急性髓细胞白血病M4Eo型患者临床表现危重。3、ETV6基因重排与急性髓细胞白血病M4Eo型患者的预后有较密切关系。ETV6重排患者对化疗不敏感,预后差。4、国内首次在急性髓细胞白血病M4Eo型患者中发现ETV6/ARG融合基因,初步揭示其致白血病机制。ETV6/ARG融合蛋白中ETV6的HLH结构域为ARG激酶结构域提供了二聚化界面,从而激活了ARG,通过信号传导途径作用于相邻的转录因子和靶基因,造成细胞的恶性转化。5、Split-signal FISH是检测ETV6基因重排准确可靠的手段,在一些特殊染色体异常检测中,有助于精确的诊断和预后评估。