精子染色质去致密因子与鱼精蛋白/组蛋白动力学反应研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anwencheng2005
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对有性生殖生物而言,精子染色质去致密(sperm chromatin decondensation,SCD)是受精过程中的一个普遍现象,为合子形成及胚胎正常发育所必需。SCD由卵子细胞质中去致密因子介导,因精子染色质上鱼精蛋白的去除而导致形态上成倍膨胀。我们及其它实验室前期的研究表明:Nucleoplasmin(NPL)、多聚谷氨酸,RNA等带负电的大分子都具有导致SCD的能力,但对这些分子与鱼精蛋白相互作用的动力学研究所知甚少。本文应用磁镊(Magnetic tweezer)和表面等离子共振(Surface plasmonresonance,SPR)等技术手段,在分子水平研究了带负电的大分子所介导的精子染色质去致密过程。首先,以非洲爪蛙卵细胞提取物为研究体系,我们追踪了卵子细胞质中与鱼精蛋白具结合能力的活性组分,发现铁蛋白具备与NPL相似的SCD活性。进一步研究发现:卵子中的铁蛋白是一种由6亚基组成的铁蛋白,能特异地与组蛋白H2A、H2B结合,但与组蛋白H3、H4结合力极低,这些特性明显不同于NPL。其次,我们比较了NPL、铁蛋白、多聚谷氨酸,RNA等具有导致SCD能力的大分子与鱼精蛋白相互作用的动力学。发现这些因子与鱼精蛋白的结合力度强弱顺序是:卵里提取的NPL>卵巢提取的NPL>RNA>铁蛋白>多聚谷氨酸。这些结果表明:1)精子核去致密并不是特异蛋白的作用过程,能和鱼精蛋白结合的带负电的大分子都具有导致SCD的能力,因此推测受精过程中的SCD可能是多种分子协同作用的结果;2)卵子中6亚基组成的铁蛋白是特异结合H2A、H2B的组蛋白分子伴侣。
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