基于化学—遗传—生态特征的中药材品质变异研究

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中药材品质变异是物种对不同生态环境长期适应与自然选择的结果。遗传因素是中药材品质变异的生物学实质,环境因素是中药材品质变异的生态学实质。我国地理气候条件复杂多样,不同产地的同种药材品质差异显著,形成了特有的中药多道地、多产区现象。本文应用化学-遗传-生态相关性的综合分析新体系,运用转录组学技术、代谢组学技术、DNA条形码分子标记技术、UPLC-QTOF/MS技术并结合《药用植物全球产地生态适宜性信息系统》(Geographic Information System forGlobal Medicinal Plants,GMPGIS),对肉苁蓉、黄花蒿品质变异机理进行综合分析。主要研究结论如下:1.对肉苁蓉进行品质变异分析,发现盐碱地、草地、沙地三种生境的肉苁蓉代谢物含量有显著差异,其中苯乙醇苷类成分总量呈现依次降低趋势。采用高通量测序技术对盐碱地、草地、沙地3种不同生境的肉苁蓉转录组测序,分别获得7.54G、7.50G、7.52G的原始数据。对转录本进行从头拼接获得52043条Unigenes,长度从201bp到15544bp不等,转录本长度N50为1362bp。对差异表达基因进行注释,找到苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酸-CoA连接酶(4CL)等11个苯乙醇苷类合成关键酶基因的候选基因。通过单核苷酸变异(SNP)的检测与注释,发现36条含SNP的Unigene注释到苯丙烷生物合成途径,其中5条为PAL候选基因,3条为4CL候选基因。这些基因的差异表达与变异可能是导致肉苁蓉品质差异形成的生物学原因。应用GMPGIS技术对肉苁蓉进行适宜性区划和生态因子研究,发现中国、哈萨克斯坦、蒙古为适合肉苁蓉生长的潜在适宜区,年均日照、相对湿度对肉苁蓉生长影响较大。此外,对肉苁蓉的DNA条形码、转录组、代谢组与生态数据建立数据库,有利于数据的管理与共享。2.对黄花蒿进行品质变异分析,发现全国不同地区青蒿素含量有较大差异。秦岭-淮河分界线以南地区黄花蒿中青蒿素含量较高,并且形成以武陵山区为中心向四周扩散减低趋势。而分界线以北地区青蒿素含量普遍较低。运用DNA条形码分子标记技术对黄花蒿的遗传变异进行分析,发现黄花蒿种质资源存在着显著的遗传差异和丰富的多样性,且遗传多样性出现一定地域相关性。秦岭-淮河分界线以南地区遗传多样性有尤为丰富,这与青蒿素含量的分布趋势相似。利用GMPGIS技术平台预测高品质黄花蒿的潜在分布区,发现中国秦岭-淮河分界线以南地区为高品质黄花蒿最大的生态适宜区。光照、湿度等生态因子是影响黄花蒿品质的关键生态因子。该分析结果为更好地解释肉苁蓉、黄花蒿品质变异的形成机制提供了新思路,也为中药材品质变异理论研究提供科学依据。
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