·中文论著摘要一·妊娠早期母体血清甲状腺过氧化物酶抗体阳性对后代智力发育影响的前瞻性研究目的胎儿的甲状腺功能在妊娠前三个月尚未完全建立,其身体及大脑发育所需用的甲状腺激素主要来源于母体,此时母体甲状腺功能减退或亚临床甲状腺功能减退均可能影响后代神经智力发育。妊娠期母体甲状腺过氧化物酶抗体(Anti-thyroperoxidase Antibody, TPOAb)阳性是妊娠期母体发生甲减或亚临床甲减的重要危险因素。流行病学研究发现妊娠晚期母体TPOAb阳性可能影响后代神经智力发育。但妊娠早期母体血清TPOAb阳性对后代神经智力发育的影响暂时还不清楚。本前瞻性研究旨在探讨妊娠早期母体血清TPOAb阳性及不同滴度TPOAb对后代20～30月龄时神经智力发育的影响。方法研究对象来自于辽宁省沈阳市10家医院妇产科门诊进行常规产前检查并同意参加流行病学调查的妊娠早期妇女,共1761名,入选标准为：1)妊娠8周以内；2)无碘缺乏地区的居住史；3)无甲状腺疾病的个人史和家族史；4)无其他自身免疫性疾病的个人史；5)无严重消耗性疾病史；6)妊娠期间无饮酒史及吸烟史；7)无不孕不育史及人工生育史。留取了空腹晨尿和非抗凝静脉血并分离血清,测定血清TSH. FT4、TPOAb及尿碘水平。以TPOAb>50 IU/mL为切点筛查到TPOAb升高孕妇49例,根据妊娠期TPOAb的动态变化将其进一步分为两个亚组：TPOAb-A1组(50 IU／mL<TPOAb≤300 IU／mL,19例)和TPOAb-A2组(TPOAb>300 IU／mL,30例)。同时选择30例甲功正常,TPOAb≤50 IU／mL的孕妇30例作为对照组,对研究对象的后代在20～30月龄时应用贝利婴幼儿发育测量表(Bayley Scales of Infant Development BSID)进行智力和运动发育指数测评。应用SPSS 16.0统计软件对数据进行分析。结果妊娠早期母亲TPOAb阳性A1、A2亚组后代平均智力评分分别比对照组低2.27和6.67分(P=0.329及P=0.002),平均运动评分分别比对照组低1.78和7.00分(P=0.430及P=0.009)。智力评分和运动评分与母亲血清TPOAb水平呈明显负相关(r=-0.380,P=0.001和r=-0.410,P<0.001)。多组间比较显示不同水平TPOAb影响后代智力和运动评分(F=4.150,P=0.008和F=3.258,P=0.024)。有序logistic回归分析显示母亲血清TPOAb>300 IU/mL导致后代智力评分和运动评分降低的风险分别是对照组的3.77、6.32倍(95%CI 1.426～9.95P=0.007,95%CI 2.31～17.287 P=0.000)。结论妊娠早期母体血清TPOAb>300 IU/mL与其后代智力发育指数和运动发育指数下降显著相关,并且随着血清TPOAb滴度增加,这种不良影响进一步加重。·中文论著摘要二·妊娠中期母体亚临床甲状腺异常对后代智力发育影响的流行病学研究目的甲状腺激素对胎儿的神经智力发育至关重要。目前认为妊娠期母体甲状腺功能减退症(甲减)与其后代神经智力发育异常有关,但是关于妊娠期母体亚临床甲状腺异常对其后代是否具有影响仍然存在争论。本研究旨在对妊娠16～20周妇女亚临床甲状腺异常(单纯亚临床甲减、单纯低T4血症和单纯TPOAb阳性)的后代智力发育水平和运动发育水平进行检测,从而探讨妊娠中期母体亚临床甲状腺疾病对后代神经智力发育的影响,为开展妊娠期妇女甲状腺疾病筛查及治疗提供依据。方法选择1268名妊娠16～20周妇女2年前保存的血清,测定其TSH、TT4、FT4和TPOAb。入选标准为：1)妊娠16～20周；2)无碘缺乏地区的居住史；3)无甲状腺疾病的个人史和家族史；4)无其他自身免疫性疾病的个人史；5)无严重消耗性疾病史；6)妊娠期间无饮酒史及吸烟史；7)无不孕不育史及人工生育史。应用妊娠特异性甲状腺功能参考值,筛查并成功随访亚临床甲状腺功能减退症(亚临床甲减)18例,低甲状腺素血症(低T4血症)者19例,甲功正常且甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)阳性者34例。按1：2比例选择同批142名甲功正常,TPOAb阴性同孕龄妇女做对照,对她们的后代在25-30月龄时应用BSID进行智力和运动发育指数的测评。应用SPSS 16.0统计软件对数据进行分析。结果妊娠16～20周母亲亚临床甲减组后代智力评分为109.89±13.81分,比对照组低8.88分(P=0.008)；运动评分108.11～9.93分,比对照组低9.98分(P<0.01)。低T4血症组后代的智力评分为112.32±15.10,比对照组低9.30分(P=0.004)；运动评分112.21±12.26分,比对照组低7.57分(P=0.007)。甲功正常TPOAb阳性组后代的智力评分为112.70±20.64分,比对照组低10.56分(P=0.001)；运动评分110.64±12.49分,比对照组低9.03分(P<0.001)。母亲血清TSH增高、TT4减低、TPOAb阳性导致智力评分减低的OR值分别为15.5、6.9和3.3,导致运动评分减低的OR值分别为8.5、7.2和7.3。结论1.妊娠中期母亲单纯亚临床甲减与其后代智力发育指数和运动发育指数下降显著相关。2.妊娠中期母亲单纯低T4血症与其后代智力发育指数和运动发育指数下降显著相关。3.妊娠中期母亲单纯TPOAb阳性与其后代智力发育指数和运动发育指数下降显著相关。·中文论著摘要三·甲状腺球蛋白免疫Lewis大鼠诱导Graves病动物模型的实验研究目的自身免疫甲状腺病是一种常见的器官特异性自身免疫病,主要包括：桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis, HT)和Graves病(Graves’ disease, GD)。HT的主要特点包括：血清TPOAb和TgAb阳性,甲状腺组织内淋巴细胞浸润,伴有或者不伴有甲状腺功能改变；GD的特点为血清TSAb阳性,甲状腺组织弥漫性肿大并伴有甲状腺滤泡上皮细胞增生,以及出现甲状腺毒症,GD中50%-80%的患者伴有TPOAb和／或TgAb阳性。甲状腺球蛋白(thyroglobulin, Tg)联合弗氏佐剂免疫大鼠是制备实验性自身免疫甲状腺炎(Experimental thyroiditis, EAT)动物模型的经典方法,我们以该法免疫Lewis大鼠旨在建立EAT动物模型时发现所有大鼠经免疫后不仅TPOAb、TgAb升高而且出现明显的甲状腺功能亢进等类GD样表现。与此同时国际上有两篇相似的报道：Tg联合弗氏佐剂免疫小鼠诱发了甲亢。因此为了确定Tg免疫Lewis大鼠诱发甲亢模型的可重复性及其发病特点,以探索建立一种新的GD动物模型,我们进行了如下研究。方法选择6周龄雌性Lewis大鼠80只,随机分为Tg+弗氏佐剂免疫组(Tg免疫组)以及单纯弗氏佐剂免疫组(对照组),每组各40只。Tg免疫组每只大鼠足垫部皮下注射乳化后的猪Tg(PTg)200μg作为初次免疫,2周后以不完全弗氏佐剂(IFA)乳化的PTg200μg背部及腹股沟皮下多点注射进行加强免疫(第一次加强免疫),以后每周加强免疫1次,共加强免疫8次。在加强免疫的第2、4、6、8周眶后取血,检测各时间点大鼠体重及血清TT3、TT4、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平；加强免疫第4周及8周时测定大鼠甲状腺吸碘率及留取甲状腺组织行HE染色；生物学方法检测加强免疫8周时大鼠血清TSAb的活性。制备加强免疫8周大鼠的脾淋巴细胞,尾静脉注射给未经免疫的Lewis大鼠进行脾淋巴细胞的被动转移实验,检测接受脾淋巴细胞转移的大鼠血清TT4的变化。10只大鼠加强免疫8周后停止免疫,继续观察大鼠甲状腺功能及抗体的动态变化至停止免疫12周。应用SPSS 16.0软件处理和分析数据。结果Tg联合弗氏佐剂加强免疫Lewis大鼠2周时大鼠血清TT3、TT4、开始升高,随着免疫次数增多,大鼠血清TT3、TT4、TPOAb、TgAb持续升高,加强免疫8次后停止免疫仍继续升高,停止免疫8-10周时血清TT3、TT4、TPOAb、TgAb达到最高峰,最高峰时的甲状腺激素和抗体水平达到免疫前的15-20倍,随后甲状腺激素和抗体水平逐渐降低。Tg免疫组大鼠的TSAb阳性率66.67%,平均活性210.7%,明显高于对照组(P=0.004)。Tg免疫组甲状腺24小时吸碘率亦显著高于对照组(P=0.005)。甲状腺组织HE染色发现,Tg免疫组中大鼠甲状腺弥漫性肿大,甲状腺滤泡大小不一,滤泡壁上皮细胞明显受压,内含丰富的颗粒状物质并伴有明显增生,呈多层分布,但甲状腺内没有发现淋巴细胞浸润。脾淋巴细胞转移实验发现：回输加强免疫8周大鼠的脾淋巴细胞后9天大鼠血清TT4明显升高(P<0.05),在脾淋巴细胞转移后15天血清TT4浓度开始逐渐降低。结论甲状腺球蛋白联合弗氏佐剂免疫Lewis大鼠可以诱发甲状腺毒症,并伴随TPOAb和TgAb升高,TSAb阳性,甲状腺吸碘率升高及甲状腺弥漫性肿大,提示该方法建立的大鼠动物模型具有GD动物模型的特点。