枯草芽孢杆菌因其在恶劣环境下产生难以杀灭的孢子,会对人们的生命健康造成不利的影响。受控膜内蛋白水解（Regulated intramembrane proteolysis,RIP）是孢子形成过程中重要的关键过程,RIP参与枯草芽孢杆菌孢子成熟的最后一个阶段即pro-σK因子的激活。此过程由多个蛋白协同参与调节,主要包括BofC、SpoⅣB、CtpB、SpoⅣFA、Spo IVFB和Bof A。SpoⅣB和Ctp B先后切割SpoⅣFA-Spo IVFB-Bof A三元复合物中的SpoⅣFA从而释放Spo IVFB并具有活性。激活后的Spo IVFB与其底物pro-σK相互作用,并将pro-σK转变为其活性形式σK,最后促进孢子形成。有研究表明BofC通过作用于SpoⅣB起到抑制孢子形成的调控作用,但是BofC和SpoⅣFA与SpoⅣB相互作用的机理还不清楚,因此解析这些蛋白及复合物的晶体结构不仅可以了解其结构信息,还可为阐明其与SpoⅣB相互作用进而调控孢子形成的机理奠定基础。在本论文中,我们分别对BofC,SpoⅣB和SpoⅣFA进行研究,研究内容和结果如下:我们采用大肠杆菌表达系统分别大量表达并纯化重组BofC、SpoⅣFA和SpoⅣB蛋白。虽然我们通过大量的尝试,在体外组装并未获得BofC和SpoⅣFA与SpoⅣB的复合物蛋白,但我们通过座滴蒸汽扩散法得到BofC蛋白的晶体并优化晶体生长,并且尝试通过X射线晶体衍射的方法解析BofC蛋白三维结构。另外,我们也开展了采用枯草芽孢杆菌表达系统来重组表达上述蛋白,以期获得具有胞内生物学活性的蛋白。除此以外,在附加工作中我们还对卡莫司他对于丝氨酸蛋白酶的抑制机制进行了探究。在研究中我们测定了卡莫司他对几种典型丝氨酸蛋白酶的抑制效果,通过X射线晶体衍射法分析卡莫司他和u PA-SPD蛋白共结晶,探究卡莫司他抑制丝氨酸蛋白酶的机制。比对TMPRSS2和典型丝氨酸蛋白酶氨基酸序列,推测卡莫司他抑制TMPRSS2可能的作用机制。