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辐照技术是目前广泛使用的一种保鲜杀菌技术,该项技术在食品行业发展良好,并逐渐商业化。虽然国内外的研究学者针对辐照技术给予安全无危害的结论,但是仍规定某些特殊食品或特定食品不得进行辐照处理(如婴幼儿食品原料、功能食品等)。由于此项技术管理处于发展阶段,市场上存在着非法辐照,过量辐照、无辐照标示等一系列现象,不仅损害了消费者的知情权和切身利益,更重要的是在国际贸易方面,由于非法辐照而被检出退货,严重限制或阻碍了我国的食品出口。为此,应大力开展辐照食品检测与鉴定技术的研究,尤其针对于特殊食品等空白领域,制定相关的标准法规与技术保障。 本研究针对脂类功能食品中辐照标志物——2-烷基环丁酮(2-十二烷基环丁酮与2-十四烷基环丁酮)以及蛋白类功能食品中辐照标志物——邻酪氨酸与间酪氨酸进行鉴定检测技术研究,并研究了辐照技术对鱼油品质的影响,为脂类功能食品的辐照处理提供理论依据。 为了探索辐照鱼油有效可靠的鉴定方法,建立了固相萃取-气相色谱/质谱联用法检测辐照鱼油中辐解产物2-烷基环丁酮的方法。鱼油用正己烷溶解,ProElut Silica固相萃取柱净化,GC/MS检测。结果表明,2-烷基环丁酮与其他杂峰得到良好的分离,在0.01~1.0 mg/L浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性,线性相关系数(R2)大于0.9990。在空白鱼油中添加0.01、0.05和0.10 mg/kg水平的2-烷基环丁酮,平均加标回收率为91.2%~96.0%,相对标准偏差小于6.0%(n=6),方法检测限(LOQ)10μg/kg。该方法测定不同辐照剂量下的鱼油,表明辐照剂量与辐照鱼油中2-烷基环丁酮含量存在线性相关关系,线性相关系数(R2)大于0.9990。 建立了气相色谱/三重四级杆串联质谱联用(GC-QqQ-MS/MS)法同时检测油脂类功能食品中辐照标志物2-烷基环丁酮(2-ACBs)类化合物中2-十二烷基环丁酮(2-DCB)和2-十四烷基环丁酮(2-TCB)的方法。样品用正己烷溶解,过ProElut Silica固相萃取柱净化,GC-QqQ-MS/MS测定。结果表明,2-DCB、2-TCB与基质干扰峰得到良好的分离,在0.005~1.0 mg/L浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性,线性相关系数(R2)大于0.9990。在油脂类功能食品中添加0.01、0.05和0.10 mg/kg水平的2-DCB和2-TCB,平均加标回收率为85.6%~97.1%,相对标准偏差小于7.0%(n=6),方法测定低限(LOQ)5μg/kg。应用本方法于实际样品分析,表明辐照剂量与辐照油脂类功能食品中2-DCB和2-TCB含量存在线性相关关系,线性关系良好(R2>0.9956)。方法操作简便、耗时短、灵敏度高、稳定性好,应用于实际样品的分析,针对油脂类功能食品是否经过辐照给予定性鉴定和定量检测,为辐照油脂类功能食品中辐照标志物的检测方法研究提供理论依据。 建立了液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)法同时检测辐照蛋白类功能食品中邻酪氨酸(o-tyrosine)和间酪氨酸(m-tyrosine)的分析方法。样品在氮气环境下经6 mol/L盐酸酸解过夜,酸解液氮气吹干,1 mL水复溶后,用Phenomenex Kinetex PFP色谱柱分离,以5 mmol/L乙酸铵溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱。质谱采用电喷雾负离子(ESI-)模式电离,多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配标准溶液外标法定量。酪氨酸同分异构体与基质干扰峰得到良好的分离,在0.005~1.0 mg/L浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性,线性相关系数(R2)大于0.9990。在乳清粉和乳清蛋白粉中添加3个水平的酪氨酸同分异构体,平均加标回收率为81.7%~98.2%,相对标准偏差小于8.0%(n=6),方法定量限(LOQ)和检出限(LOD)分别为5.0μg/kg、8.0μg/kg和1.5μg/kg、2.4μg/kg。该方法应用于实际样品分析,表明辐照剂量与辐照蛋白类功能食品中o-tyrosine和m-tyrosine含量存在相关性,符合拟合多项式(R2>0.9850)。该方法针对蛋白类功能食品是否经过辐照给予定性鉴定和定量检测,为辐照蛋白类功能食品中辐照标志物的检测方法研究提供理论依据。 本文对不同贮藏时间及不同辐照剂量(0.5 kGy~10.0 kGy)的鱼油进行酸价(AV)和过氧化值(POV)的测定,并利用乙酰氯-甲醇甲酯化-FID气相色谱方法对辐照鱼油软胶囊中功效成分二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)进行含量测定与分析。结果表明,随辐照剂量增大、贮藏时间增长,鱼油的AV有不同程度的升高;POV升高到一定值后下降;辐照剂量0.5~10.0 kGy范围内,EPA和DHA含量随辐照剂量增大呈下降趋势,存在一定相关性(符合拟合多项式:y=0.0659x2-1.5532x+98.35,R2=0.9999;y=0.05595x2-1.8656x+128.27,R2=0.9990)。 以本文建立的3种鉴定检测方法,通过对脂类和蛋白类功能食品辐照标志物的检测与鉴定,能较为准确地判定此类功能食品是否经过辐照,有助于提升我国对食品安全的检测技术水平,为政府职能部门食品安全监管提供技术支撑,保障我国功能食品辐照的安全,保障了消费者的切身利益。