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目的:观察异钩藤碱（Isorhynchophylline,IRN）对β-淀粉样蛋白25-35(beta amyloid peptides 25-35,Aβ25-35)损伤的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞（rat pheochromocytoma cell,PC12）凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:（1）接种传代培养PC12细胞。（2）将对数生长期的PC12细胞分为正常对照（Control）组、模型（Model）组以及6个浓度梯度的IRN组。其中IRN干预的各组先以不同浓度梯度的IRN作用于PC12细胞2h后,再与20μmol/L的Aβ25-35共孵育24h。CCK-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）法检测细胞存活率;结晶紫比色法测定细胞增殖率,筛选出3个IRN的干预浓度。（3）流式细胞仪检测细胞凋亡率。（4）比色法检测细胞丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）活力;2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）荧光法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）。（5）Rhodamine123荧光染色法检测线粒体膜电位。（6）ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）含量。（7）Western blot法检测细胞核转录因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）、白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cysteine-containing aspartate specific proteases-3,Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 Associated X Protein,Bax）及细胞色素C（Cytochrome C,Cyt C）的表达。结果:（1）与Control组细胞存活率[（99.32±0.21）%]和增殖率[（99.56±0.42）%]相比,Model组细胞存活率[（51.01±2.24）%]和增殖率[（50.86±2.36）%]显著降低（P<0.05）;与Model组相比,不同浓度梯度的IRN组细胞存活率[（55.62±2.70）%、（59.05±2.06）%、（76.03±1.97）%、（66.26±1.41）%、（57.22±2.86）%、（52.32±2.65）%]和增殖率[（58.74±2.44）%、（76.22±1.86）%、（67.56±1.82）%]升高（P<0.05）,其中20μmol/L IRN组升高最明显。因此,将IRN的3个浓度分别确定为5μmol/L、20μmol/L和80μmol/L。（2）流式细胞结果显示,与Control组细胞凋亡率[（2.50±1.02）%]比较,Model组细胞凋亡率[（25.31±2.62）%]增高（P<0.05）;与Model组比较,IRN组PC12细胞凋亡率[（23.10±1.52）%、（14.07±2.02）%、（22.67±1.12）%]下降（P<0.05）。（3）比色法检测结果显示,与Control组SOD[（366.89±7.85）U/mg prot]、GSH-Px活力[（372.16±6.58）mU/mg]和MDA水平[（586.14±24.81）nmol/mg prot]比较,Model组SOD[（162.26±5.15）U/mg prot]、GSH-Px[（92.65±11.35）mU/mg]活力降低,MDA水平[（1343.42.49±26.42）nmol/mg prot]升高（P<0.05）;与Model组比较,IRN组PC12细胞SOD[（195.11±18.26）U/mg prot、（296.64±4.12）U/mg prot、（272.34±4.26）U/mg prot]、GSH-Px[（181.72±10.24）mU/mg、（278.82±3.68）mU/mg、（248.73±9.42）mU/mg]活力升高,MDA水平[（958.76±21.96）nmol/mg prot、（628.16±14.46）nmol/mg prot、（716.32±17.88）nmol/mg prot]下降（P<0.05）。（4）荧光倒置显微镜下显示,与Control组比较,Model组PC12细胞荧光增强,线粒体膜电位耗散量增加,ROS增加;与Model组比较,IRN组PC12细胞荧光减弱,膜电位耗散量减低,ROS减少。（6）ELISA检测结果显示,与Control组TNF-α水平[（546.34±11.78）pg/mL]比较,Model组TNF-α水平[（894.18±11.96）pg/mL]升高（P<0.05）;与Model组比较,IRN各组PC12细胞TNF-α水平[（838.24±10.16）pg/m L、（718.26±10.82）pg/m L、（786.44±8.26）pg/m L]下降（P<0.05）。（7）Western blot结果显示,与Control组NF-κB（1.03±0.00）、Bcl-2（1.16±0.00）、Bax（1.28±0.00）、Caspase-3（0.76±0.00）、IL-1β（0.84±0.00）和Cyt C（0.80±0.00）表达水平比较,Model组NF-κB（2.43±0.01）、Bax（2.32±0.01）、Caspase-3（2.35±0.01）、IL-1β（2.72±0.01）和Cyt C（1.21±0.01）表达升高（P<0.05）,Bcl-2（0.74±0.01）表达下降（P<0.05）;与Model组比较,IRN-20和IRN-80组PC12细胞NF-κB[（1.58±0.02）、（2.19±0.02）]、Bax[（1.36±0.02）、（1.44±0.02）]、Caspase-3[（0.82±0.02）、（0.75±0.02）]、IL-1β[（1.65±0.02）、（1.30±0.02）]和Cyt C[（0.78±0.02）、（0.93±0.02）]表达水平下降（P<0.05）,Bcl-2（1.55±0.02）、（1.45±0.02）]表达升高（P<0.05）。结论:IRN可提高Aβ25-35损伤的PC12细胞存活率和增殖率,改善Aβ25-35损伤线粒体所引起的PC12细胞凋亡。其机制可能为:（1）IRN通过减少ROS和MDA水平,增加SOD及GSH-PX活力,增加细胞的抗氧化能力。（2）IRN通过减少TNF-α和IL-1β的表达,抑制NF-κB表达及其炎症信号通路。（3）IRN通过稳定线粒体膜电位,增强Bcl-2表达的同时抑制Bax,继而调节Cyt-C与Caspase-3的表达。