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玫瑰(Rosa rugosa Thunb.)是传统的精油用花卉,玫瑰精油的主要成分为香茅醇、香叶醇等单萜醇及其乙酸酯类衍生物乙酸香茅酯、乙酸香叶酯等。我们前期研究发现,脱氧木酮糖5-磷酸还原异构酶(RrDXR)和Alcohol acyl transferase醇类乙酰基转移酶(RrAAT)基因是玫瑰单萜类花香成分生物合成途径中的关键基因。本研究构建了这两个基因的超表达载体、建立了矮牵牛再生体系和遗传转化体系,并尝试通过农杆菌介导法转入矮牵牛,以验证其功能,主要研究结果如下：1、以‘唐红’玫瑰盛开期花瓣为试材,利用CTAB法提取其总RNA,获取目的基因后成功构建了pCAMBIA1304-DXR和pCAMBIA1304-AAT超表达载体,并导入农杆菌EHA105保存备用,为目的基因转化矮牵牛进一步验证其功能奠定了基础。2、试验通过MS培养基直接播种无菌种子的方法繁殖矮牵牛’EAGLE’无菌材料。通过使用不同的灭菌方法添加不同浓度的激素组合,筛选出诱导矮牵牛愈伤组织产生分化以及生根的最佳灭菌方法和培养基,建立了矮牵牛的再生体系。实验表明,最佳灭菌方法为采用75%的酒精消毒,种子发芽率最高为93.33%;最佳愈伤诱导分化培养基为MS+1.5mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8；最佳生根培养基为1/2MS+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8。3、试验在矮牵牛再生体系的基础上,进一步建立了其遗传转化体系,筛选出叶片愈伤诱导分化培养基选择抗生素Hyg浓度为5mg/L,不定芽生根培养基选择抗生素Hyg浓度为3mg/L,抑菌抗生素Cef浓度为300mg/L。试验采用农杆菌介导的叶盘转化法,将pCAMBIA1304-DXR和pCAMBIA1304-AAT超表达载体转入矮牵牛,已使受侵染的叶盘在选择培养基上诱导出愈伤组织和不定芽。