论文部分内容阅读
糖蛋白是生物体内一类重要的具有生物信息与结构功能的大分子。另外,许多天然植物糖蛋白本身就是很好的药物,具有降血糖、增强免疫、消炎、抗肿瘤等功效,以糖蛋白为基础的重组蛋白药物在临床上也早已应用。茶树叶中糖蛋白是茶叶多糖的主要活性成分,而茶叶多糖对治疗人体的糖尿病等保健功效早为人们所认同。本文以茶树叶为试材,做了茶树叶糖蛋白的提取、分离、鉴定、纯化的研究。比较了不同的缓冲液种类、不同pH条件下茶树叶总蛋白提取的效果,采用丙酮粉加PVPP提取方法、BufferA为提取缓冲液,提取茶树叶总蛋白。从茶树叶总蛋白中分离糖蛋白,用不同饱和度的硫酸铵分四级沉淀茶树叶总蛋白,分别为0—20、20—40、40—60、60—80。各分级蛋白进行SephadexG-100凝胶过滤,使分级蛋白中的蛋白质按其分子量的大小先后洗脱,从每个分级蛋白凝胶过滤的收集液中,鉴定了茶树叶糖蛋白。茶树叶糖蛋白的鉴定采用凝胶过滤法初步定性鉴定和SDS—PAGE、胶上糖蛋白染色法。根据收集管中洗脱液的280nm蛋白吸收峰与苯酚-硫酸法测定的糖量趋势是否一致,初步定性鉴定出两个区域的收集管中有糖蛋白。