氮氧自由基-四氧化三铁杂化纳米粒子在肿瘤自噬诊疗中的研究

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随着恶性肿瘤发病率的不断提高,恶性肿瘤目前已经是导致人类死亡的最大原因之一。人体内的恶性肿瘤与正常组织细胞在生长过程上有着不同的特征,比如细胞的自噬情况。自噬不仅为肿瘤生长和转移提供必要的能量和底物供给,而且还与肿瘤细胞对化疗耐药性的提高有关。因此,如何有效地监测体内肿瘤的自噬情况,以及通过调节肿瘤细胞的自噬水平以提高化疗治疗效果就变得尤为重要。在本研究中,我们首先通过制备氮氧自由基-四氧化三铁(Fe3O4-NO·)杂化纳米粒子,研究肿瘤细胞内部的自噬情况,然后再根据肿瘤细胞的自噬情况,通过调节肿瘤自噬联合化疗药物进行抗肿瘤治疗。具体工作如下:(1)首先,我们制备了一种具有肿瘤细胞自噬监测功能的磁共振成像(MRI)造影剂。通过在四氧化三铁纳米颗粒表面接枝树枝高分子,并在末端修饰氮氧自由基(NO·),合成了Fe3O4-NO·纳米粒子。其中,氮氧自由基和四氧化三铁分别可以用于增强T1和T2加权MR成像。因为自噬水平的提高会伴随着细胞内活性氧自由基(ROS)的产生,所以氮氧自由基可以被细胞内的ROS所淬灭,导致氮氧自由基产生的T1信号减小。同时,Fe3O4基本不受细胞内自噬水平变化的影响,使得T2信号基本不会发生变化。另外,我们还通过在四氧化三铁表面接枝高分子,提高了单个纳米粒子上的氮氧自由基数量,避免单个氮氧自由基存在的弛豫率低的问题。综上,我们成功地利用了合成的Fe3O4-NO·纳米粒子对肿瘤细胞进行自噬监测。(2)其次,我们引入了自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),通过化学的方法诱导或抑制肿瘤组织细胞的自噬。我们通过ROS检测和磁共振成像等方式确定3-MA和雷帕霉素的工作浓度。然后在3-MA和雷帕霉素的工作浓度下,结合化疗药物盐酸阿霉素(Dox)进行体外抗肿瘤治疗。最后,通过对荷瘤小鼠进行不同治疗方案(自噬调节+Dox)的治疗,我们发现3-MA与Dox联合治疗的效果最好。因此,我们可以得出自噬抑制剂3-MA通过抑制肿瘤细胞的自噬行为,阻碍了自噬为肿瘤细胞提供能量和反应底物的途径。3-MA使肿瘤细胞的应激能力减弱,从而让化疗达到了更好的治疗效果。
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